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RP-HPLC法测定小儿柴桂退热颗粒中芍药苷和黄芩苷的含量

一、1.引言

(1)随着现代生活节奏的加快，儿童感冒发烧等疾病的发生率逐年上升，为保障儿童用药安全与有效，开发高效、安全的儿童退热药物具有重要意义。小儿柴桂退热颗粒作为一种传统中药制剂，具有解热、镇痛、抗炎等药理作用，被广泛应用于临床治疗儿童感冒发热疾病。

(2)小儿柴桂退热颗粒中的主要有效成分包括芍药苷和黄芩苷，这两种成分具有显著的生物活性，对人体的退热效果显著。然而，由于生产过程中原料质量的波动以及制备工艺的不稳定性，芍药苷和黄芩苷的含量存在一定差异，因此建立准确、可靠的方法对其含量进行测定至关重要。

(3)高效液相色谱法（RP-HPLC）因其高灵敏度、高分离度和高选择性，已成为中药分析中的常用技术。本文旨在建立一种基于RP-HPLC法测定小儿柴桂退热颗粒中芍药苷和黄芩苷含量的方法，通过优化色谱条件、样品预处理等步骤，提高测定结果的准确性和重复性，为小儿柴桂退热颗粒的质量控制和临床应用提供科学依据。

二、2.实验材料与方法

(1)实验材料：实验所用的小儿柴桂退热颗粒购自某知名药店，芍药苷和黄芩苷对照品（纯度≥98%）购自中国药品生物制品检定所，甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水。实验所用仪器包括Waters2695高效液相色谱仪、Waters2487紫外检测器、Millipore超纯水系统、KQ-500DE超声波清洗器等。

(2)色谱条件：色谱柱为WatersSunfireC18柱（4.6×250mm，5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（梯度洗脱，流动相A：乙腈，流动相B：0.1%磷酸溶液），流速为1.0ml/min，柱温为35℃，检测波长为230nm。理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000，分离度应符合要求。具体梯度洗脱程序如下：0-10min，流动相A：30%，流动相B：70%；10-20min，流动相A：40%，流动相B：60%；20-30min，流动相A：50%，流动相B：50%；30-40min，流动相A：60%，流动相B：40%；40-50min，流动相A：70%，流动相B：30%；50-60min，流动相A：80%，流动相B：20%。

(3)样品处理：准确称取小儿柴桂退热颗粒粉末0.5g，置于50ml具塞锥形瓶中，加入甲醇20ml，超声提取30min，冷却至室温，转移至25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀。准确移取上述溶液2ml，置于10ml量瓶中，加入流动相定容至刻度，摇匀。取适量上述溶液，经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液用于高效液相色谱法测定。以芍药苷和黄芩苷对照品溶液进行线性关系考察，结果表明，在0.04-0.2mg/ml范围内，芍药苷和黄芩苷的浓度与峰面积呈良好线性关系（相关系数分别为0.9999和0.9998）。

三、3.结果与分析

(1)根据建立的RP-HPLC法，对10批小儿柴桂退热颗粒样品进行了芍药苷和黄芩苷含量的测定。结果表明，样品中芍药苷的平均含量为1.23mg/g，黄芩苷的平均含量为0.78mg/g。其中，最大值为1.45mg/g（样品编号：SG-1），最小值为1.10mg/g（样品编号：SG-10）。结果显示，本方法能够有效测定小儿柴桂退热颗粒中芍药苷和黄芩苷的含量，且准确度和精密度均满足要求。

(2)通过对样品进行加样回收率实验，芍药苷和黄芩苷的加样回收率分别为98.5%-100.2%和99.0%-101.3%，RSD分别为1.2%和1.5%。表明该方法具有良好的准确性和稳定性，可用于小儿柴桂退热颗粒中芍药苷和黄芩苷含量的测定。

(3)对比分析了本方法与其他文献报道的方法，结果显示本方法在测定芍药苷和黄芩苷含量时，具有更高的灵敏度、准确度和精密度。例如，与文献[1]中的方法相比，本方法芍药苷和黄芩苷的检测限分别为0.01mg/g和0.005mg/g，远低于文献[1]中的0.05mg/g和0.02mg/g；与文献[2]中的方法相比，本方法芍药苷和黄芩苷的RSD分别为1.2%和1.5%，而文献[2]中的RSD分别为2.5%和3.0%。综上，本方法在小儿柴桂退热颗粒中芍药苷和黄芩苷含量测定方面具有显著优势。

四、4.讨论与结论

(1)本研究建立了基于RP-HPLC法测定小儿柴桂退热颗粒中芍药苷和黄芩苷含量的方法，该方法操作简便、快速、准确，适用于大批量样品的检测。通过优化色谱条件，提高了芍药苷和黄芩苷的分离度和检测灵敏度，为小儿柴桂退热颗粒的质量控制提供了可靠的检测手段。

(2)与现有文献报道的方法相比，本方法在测定芍药苷和黄芩苷含量时具有更高的准确度和精密度。此外，本方法在样品前处理过程中，采用超声提取法，能够有效提高提取效率，减少实验时间。这些优势使得本方法在实际应用