培养基及其配制.ppt

AgNO3:作用：抑制乙烯活性，防止玻璃化苗的出现浓度：1-10mg/L抗生素：种类：青霉素、链霉素、庆大霉素等。作用：可防止外植体内生菌污染。浓度：5—20mg/L。第32页,共51页，2024年2月25日，星期天1、母液(stocksolution)的配制和保存所谓母液是欲配制液的浓缩液。意义:①保证各物质成分的准确性②配制时的快速移取③便于低温保藏。三、培养基的配制第33页,共51页，2024年2月25日，星期天单配法：将培养基配方中的各种成分分别配成一定浓度的母液。一般用mg/ml。混配法：将几类营养成分按配方中的用量扩大一定倍数称量，分别溶解后再混合成母液。母液配制时可分别配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等母液的配制方法：第34页,共51页，2024年2月25日，星期天ＭＳ培养基母液的配制第35页,共51页，2024年2月25日，星期天MS母液配制：MSI 大量元素20X MSII 微量元素200X MSIII 铁盐 200X MSIV 有机物 200X MSV 肌醇 200X 激素 0.1mg/ml第36页,共51页，2024年2月25日，星期天将1、2、4、5称好放入烧杯分别溶解混合，将3最后混合，再定容到1L，放入试剂瓶贴标签，备用500mL甲1、2、4、5500mL乙3＋定容贴标签1LMSIX202013.9.26HXH注：Ca2+和S042-混合后易沉淀。第37页,共51页，2024年2月25日，星期天将1～7称好放入烧杯分别溶解混合，定容到1L，放入试剂瓶贴标签，备用1000mL1～7定容贴标签1LMSIIX2002013.9.26HXH第38页,共51页，2024年2月25日，星期天MSⅢ(铁盐)配方用量mg/L200X（mg）称量(g)1.FeSO4·7H2O27.855605.562.Na2·EDTA·2H2O37.374607.46将1称好放入烧杯甲溶解，将2放入烧杯乙溶解，再混合定容到1L，放入试剂瓶贴标签，备用1L500mL甲1500mL乙2＋混合定容贴标签MSIX2002013.9.26HXH第39页,共51页，2024年2月25日，星期天将1、2、3、4称好放入烧杯分别溶解混合，定容到1L，放入试剂瓶贴标签，备用1000mL1～4定容贴标签1LMSIVX2002013.9.26HXH第40页,共51页，2024年2月25日，星期天将肌醇称好放入烧杯溶解定容到1L，放入试剂瓶贴标签，备用1000mL1溶解定容贴标签1LMSVX2002013.9.26HXH第41页,共51页，2024年2月25日，星期天母液配制时应注意事项：①母液配好后放人冰箱内低温保存（4℃），用时再按比例稀释。②其中III、IV、以及激素类物质应以棕色瓶盛装。③母液使用前摇动瓶子，如有沉淀、絮状物、微生物污染应停止使用④取样时移液管要对应取样，防止交叉污染第42页,共51页，2024年2月25日，星期天第43页,共51页，2024年2月25日，星期天2、培养基的配制：MS＋BA2＋NAA0.2＋糖3.0％＋琼脂0.7％pH=5.8MS： MSI50ml MSII5ml MSIII5ml MSIV5ml MSV5ml BA： 20ml;NAA：2ml 糖： 30g;琼脂：7gV贮备液用量＝V配制/浓缩倍数V激素贮备液＝C激素*V配制/0.1mg/ml第44页,共51页，2024年2月25日，星期天培养基的选择培养基＝基本培养基＋植物激素培养基的选择