培养基成分及配制.ppt

Zn是吲哚乙酸生物合成必需的，也是谷氨酸脱氢酶、乙醇脱氢酶等的活化剂。01Cu是细胞色素氧化酶、多酚氧化酶等氧化酶的成分，可影响氧化还原过程。02Mo是硝酸还原酶和钼铁蛋白的金属成分。03有机营养成分*碳水化合物维生素氨基酸肌醇天然复合物椰乳、水解酪蛋白、水解乳蛋白、酵母提取物、胰蛋白胨、西红柿汁、香蕉粉、橘子汁、可可汁（三）有机元素氨基酸和有机附加物（以MS培养基为例）序号化学名称化学式用量(mg/L)1肌醇C6H12O6.2H2O1002甘氨酸NH2.CH2.COOH23盐酸硫胺素C12H17CLN4OS.HCL0.14盐酸吡哆醇C8H11O3N.HCL0.55烟酸NC5H4COOH0.51.碳水化合物**选用种类：蔗糖（或葡萄糖、果糖）等蔗糖浓度：2－3%，胚培养为4－15%高压灭菌部分糖会分解；大生产时可用绵白糖不同糖类对生长的影响不同。从各种糖对水稻根培养的影响来看，以葡萄糖效果最好，果糖和蔗糖相当，麦芽糖差一些。不同植物不同组织的糖类需要量也不同，实验时要根据配方规定按量称取，不能任意取量。种类：VB1(盐酸硫胺素):促愈伤组织产生，提高活力VB6(盐酸吡哆醇):促根生长Vc(抗坏血酸):防组织褐变有时还使用生物素、叶酸、核黄素等。浓度：0.1－1.0mg/LVpp(烟酸):与代谢和胚发育有关维生素(vitamin)肌醇（环己六醇）**0504020301促进糖类物质的相互转化和活性物质作用的发挥促进愈伤组织生长以及胚状体和芽的形成对组织细胞繁殖、分化的促进作用使用浓度100mg/L注：用量过多则促褐变是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收利用。培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸、谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。氨基酸为了特殊的培养目的，在一部分培养基中还添加了一些特殊成分，如水解酪蛋白，水解乳蛋白，酵母提取物，胰蛋白胨，椰乳，西红柿汁，香蕉粉，橘子汁，可可汁等天然复合物以及活性炭，渗透调节剂等。01天然复合物02椰乳是椰子的液体胚乳。它是使用最多、效果最大的一种天然复合物。在愈伤组织和细胞培养中有促进作用。一般使用浓度在10％-20％用黄熟的小香蕉，加入培养基后变为紫色。对pH值的缓冲作用大。主要在兰花的组织培养中应用，对发育有促进作用。浓度：150-200ml/l香蕉去掉皮和芽后，加水煮30min，再经过过滤，取其滤液使用，用量为150-200g／L对pH值缓冲作用也大。添加后可得到健壮的植株。01马铃薯024)水解酪蛋白或水解乳蛋白**为蛋白质的水解物，主要成分为氨基酸（含有约20种氨基酸的混合物），使用浓度为100-200mg／L受酸和酶的作用易分解。酵母提取液(YE)(0.01％-0.05％)，主要成分为氨基酸和维生素类；麦芽提取液(0．01％-0．5％)苹果和番茄的果汁、黄瓜的果实、未熟玉米的胚乳等。其他12(四)植物激素**植物激素是指自然状态下植物体内合成，并从产生处运送到别处，对生长发育产生显著作用的微量（1微摩尔/升以下）有机物。植物生长调节剂是指一些具有植物激素活性的人工合成的物质。23145乙烯脱落酸：ABA细胞分裂素类：KT，6-BA，ZT等。赤霉素类；GA1-GA4，GA7，GA9，GA16，GA24，GA25等生长素类：IAA，IBA，2，4-D，NAA等。植物激素（植物生长调节剂）1植物生长调节物质2植物激素3植物生长调节剂4在植物组织培养中使用的生长调节物质主要有生长素类和细胞分裂素类两大类，少数培养基中还添加赤霉素GA3等1）种类IAANAAIBA2,4－D2）作用诱导愈伤组织形成和根分化，促进细胞分裂和伸长生长。根对生长素最敏感，在极低浓度下／L)就可促进生长，其次是茎和芽。3）浓度0.05－5mg/L天然的生长素热稳定性差，高温高压或受光条件易被破坏。在植物体内也易受到体内酶的分解。组织培养中常用人工合成的生长素类物质1、生长素类1是天然存在的生长素，亦可人工合成，其活力较低，是生长素中活力最弱的激素，对器官形成的副作用小，高温高压易被破坏，也易被细胞中的IAA分解酶降解，受光也易分解。IAA(吲哚乙酸)在组织培养中的起动能力要比IAA高出3-4倍，且由于可大批量人工合成，耐高温高压，不易被分解破坏，所以应用较普遍。NAA和IBA广泛用于生根，并与细胞分裂素互作促进芽的增殖和生长。