消毒产品中激素含量的测定液相色谱串联质谱法.docx

消毒产品中激素含量的测定液相色谱串联质谱法

试剂和材料

-试剂

-甲醇：色谱纯。用于作为液相色谱流动相的主要成分，因其挥发性好且能提供合适的洗脱强度，利于目标激素的分离和检测。

-乙腈：色谱纯。也是常用的流动相有机溶剂，与甲醇配合使用可优化分离效果，因为其对不同极性物质的溶解性和洗脱能力有差异。

-甲酸：色谱纯。可用于调节流动相的pH值，改善峰形，提高检测的灵敏度和准确性，同时部分激素在酸性条件下有更好的稳定性。

-超纯水：电阻率≥18.2MΩ·cm。作为流动相的另一重要组成部分，纯水中杂质少，可避免对色谱柱和检测结果的干扰。

-激素标准品：包括常见的糖皮质激素（如地塞米松、氢化可的松等）和性激素（如雌二醇、睾酮等），纯度≥98%。用于配制标准溶液，建立标准曲线，从而准确测定样品中激素的含量。

-材料

-样品瓶：用于储存待测样品，一般为玻璃材质，有合适的容积和瓶盖，以保证样品的稳定性和密封性。

-滤膜：孔径为0.22μm或0.45μm的有机系滤膜。在将样品注入色谱系统前，通过滤膜过滤可去除样品中的颗粒杂质，防止堵塞色谱柱和损坏仪器。

-移液器：不同规格，如10μL、100μL、1000μL等，用于准确移取试剂和样品。

-容量瓶：不同规格，如10mL、50mL、100mL等，用于配制标准溶液和样品溶液。

-离心管：一般为塑料材质，有不同的容积，用于样品的前处理过程中的离心操作。

仪器和设备

-液相色谱仪

-具备二元或多元泵系统，能精确控制流动相的组成和流速。泵的精度和稳定性对于保证色谱分离的重复性至关重要。

-自动进样器：可准确地将样品注入色谱柱，减少人工进样的误差，提高分析效率和准确性。

-柱温箱：能精确控制色谱柱的温度，因为温度对色谱分离效果有较大影响，保持恒定的温度可使分离结果更加稳定。

-质谱仪

-采用串联质谱技术，如三重四极杆质谱仪。具有高灵敏度和高选择性，能够对目标激素进行准确的定性和定量分析。

-配备电喷雾离子源（ESI）或大气压化学电离源（APCI），根据目标激素的性质选择合适的离子源，以获得最佳的离子化效率。

-真空系统：为质谱仪提供高真空环境，保证离子在分析器中能够稳定飞行和检测，减少离子与气体分子的碰撞，提高仪器的性能。

-离心机

最大转速一般不低于10000r/min，用于样品的前处理，通过离心使样品中的不溶性杂质沉淀，实现固液分离。

-涡旋振荡器

用于样品和试剂的混合，通过快速的振荡使样品在溶剂中充分溶解和分散，保证样品的均匀性。

-超声波清洗器

可用于样品的提取和容器的清洗。在样品提取过程中，超声波的空化作用能加速目标激素从样品基质中释放出来。

标准溶液的配制

-储备液的配制

-准确称取适量的激素标准品于容量瓶中，用甲醇或乙腈溶解并定容，配制成浓度为1.0mg/mL的储备液。储备液应储存于-20℃冰箱中，以保证其稳定性。

-中间液的配制

取适量的储备液，用甲醇或乙腈稀释成浓度为10.0μg/mL的中间液。中间液可储存于4℃冰箱中，有效期一般为1个月。

-系列标准工作溶液的配制

分别吸取不同体积的中间液，用流动相稀释成浓度为0.1μg/L、0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L的系列标准工作溶液。这些标准工作溶液应现用现配，以保证其浓度的准确性。

样品前处理

-固体样品

-准确称取适量（一般为1.00g）的消毒产品样品于离心管中。

-加入适量的提取溶剂（如甲醇-水混合溶液），涡旋振荡1min，使样品与提取溶剂充分混合。

-将离心管置于超声波清洗器中超声提取20min，使目标激素从样品基质中充分释放出来。

-超声结束后，将离心管以10000r/min的转速离心10min，取上清液。

-对上清液用0.22μm或0.45μm的有机系滤膜过滤，滤液待进样分析。

-液体样品

-准确量取适量（一般为1.00mL）的消毒产品样品于离心管中。

-若样品浓度较高，可用流动相进行适当稀释。

-涡旋振荡均匀后，以10000r/min的转速离心10min，取上清液。

-同样用0.22μm或0.45μm的有机系滤膜过滤，滤液用于进样分析。

液相色谱条件

-色谱柱

选择合适的反相色谱柱，如C18色谱柱（一般为2.1mm×100mm，1.7μm或2.7μm），其具有