动物细胞培养和核移植技术 (5).ppt
关于动物细胞培养和核移植技术(5)第1页,共29页,星期日,2025年,2月5日2.2动物细胞工程单克隆抗体等动物细胞工程常用的技术动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合是其他动物细胞工程技术的基础。第2页,共29页,星期日,2025年,2月5日1.动物细胞培养如何进行细胞培养?培养时又需要提供哪些必要条件呢?2.2.1动物细胞培养和核移植技术从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。1.1概念阅读课文44--46面相关内容:注意关键词:细胞贴壁接触抑制原代培养传代培养第3页,共29页,星期日,2025年,2月5日动物细胞培养的过程:原代第4页,共29页,星期日,2025年,2月5日1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液10代细胞50代细胞剪碎胰蛋白酶洗涤、稀释、分离原代培养用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,增殖能力越强,越容易培养。动物细胞培养不能最终培养成生物体细胞增殖缓慢,核型可能变化贴壁生长接触抑制10代以内,保持正常二倍体核型传代培养原理?:细胞增殖第5页,共29页,星期日,2025年,2月5日多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考以下问题:1.体外培养细胞时需要提供哪些物质?2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件?讨论葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子和动物血清等。适宜温度、PH和气体环境;无菌无毒环境36.5+0.5度PH为7.2-7.4O2和CO2(95%空气和5%CO2)第6页,共29页,星期日,2025年,2月5日无菌操作培养箱第7页,共29页,星期日,2025年,2月5日培养器皿动物细胞培养瓶内表面为什么要光滑、无毒?第8页,共29页,星期日,2025年,2月5日获得细胞细胞的全能性细胞或细胞产品新的个体或细胞产品培养结果或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清促生长因子蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较第9页,共29页,星期日,2025年,2月5日大规模的生产有重要价值的生物制品
如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体
为基因工程技术提供受体细胞
有毒物质的检测
细胞的生理、药理、病理研究
如用于筛选抗癌药物等,为治疗和预防癌症及其他疾病提供依据动物细胞培养技术的应用培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植第10页,共29页,星期日,2025年,2月5日
动物细胞特点:分化潜能变窄:随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制,分化潜能变窄,这是指整体细胞而言。细胞核仍具有全能性:细胞核,它含有保持物种遗传性所需的全套基因,而且并没有因细胞分化而丢失基因,因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性。想一想比较植物组织培养和动物细胞培养(原理、培养结果)?第11页,共29页,星期日,2025年,2月5日2.动物细胞核移植技术和克隆动物将动物的一个细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成为一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体(克隆动物)分类胚胎细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度低,恢复全能性容易细胞分化程度高,恢复全能性不容易2.1动物细胞核移植概念:第12页,共29页,星期日,2025年,2月5日卵黄膜2.2体细胞核移植的过程:请看教材P48图2-21思考:1.核移植的受体细胞是什么?处在什么时期?2.通过什么手段激活受体细胞,构建重组胚胎?MⅡ中期卵母细胞诱导方法:物理或化学方法激活受体细胞,完成细胞分裂和发育进程。3.原理:4.为什么选择卵母细胞作为核移植的受体细胞?细胞核的全能性卵母细胞体积大、易操作,含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。第13页,共2