动物细胞培养和核移植技术.ppt

关于动物细胞培养和核移植技术第1页，共25页，星期日，2025年，2月5日2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术第2页，共25页，星期日，2025年，2月5日动物细胞工程通常采用的技术手段动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体动物细胞核移植是其他动物细胞工程技术的基础。第3页，共25页，星期日，2025年，2月5日第4页，共25页，星期日，2025年，2月5日动物细胞培养概念:就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。培养过程：第5页，共25页，星期日，2025年，2月5日注意关键词:细胞贴壁接触抑制原代培养传代培养阅读课文44—46页相关内容第6页，共25页，星期日，2025年，2月5日1、该技术实施的原理是什么？原理是细胞增殖（有丝分裂）。第7页，共25页，星期日，2025年，2月5日思考：2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基2、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体第8页，共25页，星期日，2025年，2月5日胚胎组织或幼龄动物组织贴壁生长接触抑制5%CO2维持培养液的pHP46讨论第9页，共25页，星期日，2025年，2月5日剪碎胰蛋白酶10代以后，细胞增殖缓慢，细胞核型可能变化贴壁生长接触抑制2、动物细胞培养过程：转入培养液中进行原代培养转入培养液中进行传代培养制成细胞悬液胰蛋白酶制成细胞悬液第10页，共25页，星期日，2025年，2月5日一、动物细胞培养1、过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）第11页，共25页，星期日，2025年，2月5日动物细胞培养与植物组织培养的比较：植物细胞培养动物细胞培养比较项目原理培养基结果培养目的细胞的全能性细胞的增殖固体；营养物质；激素液体；营养物质动物血清培养成植株培养成细胞系或细胞株快速繁殖，培养无病毒植株等获得细胞的产物或细胞等第12页，共25页，星期日，2025年，2月5日3、动物细胞培养的条件（抗生素，更换培养液）①无菌、无毒②营养：与体内基本相同③温度和PH④气体环境（95%空气+5%CO2）（36.5±0.5℃，7.2-7.4）（合成培养基）第13页，共25页，星期日，2025年，2月5日动物细胞培养技术应用a、生产生物制品b、与基因工程相结合c、有毒物质的检测第14页，共25页，星期日，2025年，2月5日培养目的培养基特有成分培养基性质原理动物细胞培养植物组织培养植物组织培养、动物细胞培养的比较细胞的全能性获得细胞或细胞产物获得植株或细胞产品物动物血清植物激素液体培养基固体培养基细胞增殖第15页，共25页，星期日，2025年，2月5日克隆羊多利二、细胞核移植技术和克隆动物第16页，共25页，星期日，2025年，2月5日Ａ绵羊Ｂ绵羊乳腺细胞卵细胞重组胚胎C母绵羊子宫多莉羊克隆羊多利的培育过程细胞核移植胚胎移植(减Ⅱ中期卵母细胞)第17页，共25页，星期日，2025年，2月5日动物细胞核移植技术和克隆动物动物细胞核移植：是将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）分类：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容