浅谈HPLC法测定接骨丸中马钱子碱含量.pdf

浅谈HPLC法测定接骨丸中马钱子碱含

量

接骨丸至是由甜瓜子、土鳖虫、地龙、炒桂枝、郁金等八味中药

经粉碎一定细度，和一定比例的马钱子粉混合过筛，水泛丸所得。它

在临床上主要用于外界暴力所致的跌打损伤，伤筋动骨等外科疾病，

应用于临床多年，疗效确切，作为治疗伤筋动骨的要药，在市场上占

有巨大份额。马钱子在方中作为臣药，主要辅助君药加强治疗。但是

马钱子作为剧毒药物，其所含的士的宁和马钱子碱有兴奋中枢神经的

作用，使用过量容易导致惊厥、抽搐和昏迷等严重神经系统不良反应。

为了控制药品的质量，本文采用高效液相色谱(HPLC)法对接骨丸中

马钱子碱含量进行测定，进而控制该药品的安全范围，该方法操作简

单，结果准确且重现性较好。

1仪器与试药

1.1样品来源接骨丸(河北万岁药业有限公司，批号:131201)，

粉碎至一定细度，备用。

1.2仪器和试药HP-1100高效液相色谱仪(美国，型号HP-

1100);色谱柱，AgilentC18(250mmtimes;4.6mm，5mu;m)柱;超

声波清洗器(北京医疗设备二厂，型号kh-3200DB);十万分之一电子

1

天平(AE240);甲醇和乙腈试液为色谱纯;双蒸水自制;正己烷、二氯

甲烷、浓氨均为分析纯。马钱子碱对照品(中国药品生物制品鉴定所，

批号110753-200212)，士的宁对照品(中国药品生物制品制定所，

批号:110752-201212)。

2方法与结果

2.1色谱条件及系统适用性试验色谱柱为AgilentC18(250.0mm

times;4.6mm，5mu;m)柱;流动相:乙腈∶0.2%醋酸水溶液(25∶

75)，等度洗脱，检测波长设定为260nm;柱温为30℃;流速为1

mLmiddot;min-1;理论板数按马钱子碱的峰计算应不低于5000。

2.2对照品溶液的制备精密称取士的宁、马钱子碱对照品适量，

加乙酸乙酯制成每1L含0.4g的溶液，即得。

2.3供试品溶液制备取三份本品粉末分别0.5g，精密称定，置

具塞锥形瓶中，精密加氯仿25mL与浓氨试液1mL，密塞，轻轻振

摇，称定重量，放置24h，再称定重量，用氯仿补足减失的重量，充

分振摇，滤过，精密量取滤液10mL，置分液漏斗中，用硫酸溶液(3

mLrarr;100mL)提取5次，每次15mL，合并硫酸液，加浓氨试液调

节pH值至9～10，用氯仿提取5次，每次20mL，合并氯仿液，

蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，转移至10mL量瓶中，并稀释至刻度，

摇匀，即得。

2

2.4阴性供试品溶液的制备按照处方的配比情况，除去马钱子，

其他饮片按照接骨丸的制备方法制成丸剂，根据供试品的制备方法制

备阴性供试品溶液，备用。

2.5方法学考察

2.5.1线性关系考察精密吸取2.2项下混合对照品溶液2mu;L、

4mu;L、6mu;L、8mu;L、10mu;L注入高效液相色谱仪，按上述色谱

条件测定峰面积;纵坐标为峰面积，横坐标为进样量，绘制标准曲线，

得回归方程为马钱子碱Y=0.3024X-0.4023(r=0.99995);计算结

果表明马钱子碱在0