水产品中头孢类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法.docx

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水产品中头孢类药物残留量的测定

液相色谱－串联质谱法

1范围

本文件规定了水产品中头孢类药物残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。

本文件适用于鱼和虾可食组织中头孢氨苄、头孢拉定、头孢唑林、头孢哌酮、头孢乙腈、头孢匹林、头孢洛宁、头孢喹肟、头孢噻肟、去乙酰基头孢匹林残留量的检测，其他水产品可参照使用。

2规范性引用文件

下列文件中内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T30891水产品抽样办法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中残留的头孢类药物用80%乙腈溶液提取，增强型脂质去除固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱法测定，基质匹配标准溶液外标法定量。

5试剂与材料

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。

5.1.2乙腈（CH3CN）：色谱纯。

5.1.3甲酸（HCOOH）：色谱纯。

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5.2溶液的配制

5.2.130%乙腈溶液：取乙腈30mL，用水稀释至100mL。

5.2.280%乙腈溶液：取乙腈800mL，用水稀释至1000mL。。

5.2.30.1%甲酸溶液：取甲酸1mL，用水稀释至1000mL。

5.3标准品

头孢氨苄、头孢拉定、头孢唑林、头孢哌酮、头孢乙腈、头孢匹林、去乙酰基头孢匹林、头孢洛宁、头孢喹肟、头孢噻肟标准品，含量均≥95%，其它相关信息见附录A。

5.4标准溶液的制备

5.4.1标准储备液：取标准品各约10mg，精密称定，分别置于25mL容量瓶中，用30%乙腈溶液溶解并稀释至刻度，配制成浓度为400μg/mL的标准储备液。-18℃以下避光保存，有效期1个月。

5.4.2混合标准储备液：分别准确量取头孢乙腈、头孢唑林和头孢哌酮3种头孢类药物标准储备液的体积各1.0mL，其他标准储备液各0.25mL于10mL容量瓶中，用30%乙腈溶液稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL（头孢乙腈、头孢唑林和头孢哌酮3种头孢类药物的浓度为40μg/mL）的混合标准储备液。-18℃以下避光保存，有效期7d。

5.4.3混合系列标准工作液：准确移取混合标准储备液适量，用0.1%甲酸溶液稀释成浓度为0.50μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10μg/L、20μg/L和50μg/L（头孢乙腈、头孢唑林和头孢哌酮3种头孢类药物药物的浓度为2.0μg/L、4.0μg/L、20μg/L、40μg/L、80μg/L和200μg/L）的系列混合标准工作溶液，现配现用。

5.5材料

5.5.1增强型脂质去除柱：300mg/3mL，或性能相当者。

5.5.2针头式过滤器通用型滤膜：尼龙材质，孔径0.22μm或性能相当者。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。

6.2分析天平：感量0.01g和0.00001g。

6.3离心机：8000r/min或以上。

6.4氮吹仪。

6.5匀质器：10000r/min或以上。

6.6固相萃取装置。

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6.7涡旋混合器。

6.8离心管：聚丙烯塑料离心管，10mL、50mL。

7试样的制备与保存

7.1试样的制备

按GB/T30891附录B的要求制样。取适量新鲜或解冻的空白或供试样品，绞碎并使均质。

——取均质后的供试样品，作为供试试样。

——取均质后的空白样品，作为空白试样。

——取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准溶液，作为空白添加试样。

7.2试样的保存

-18℃以下保存。

8测定步骤

8.1提取

取试料（5±0.05）g，于50mL离心管中，加入80%乙腈溶液20mL，用匀质器以10000r/min以上速度匀质1min，8000r/min离心5min，移取上清液用80%乙腈溶液稀释至25.0mL，备用。

8.2净化

取固相萃取柱，准确移取5.0mL备用液过柱，再用2mL80%乙腈溶液洗脱，保持过柱流速1～2mL/min，收集流出液和洗脱液于10mL离心管中。收集到的溶液在45℃水浴氮吹至约0.5mL，用0.1%甲