藜麦中齐墩果酸含量的测定 高效液相色谱法（文本）.pdf

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X62

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团体标准

T/NAIA×××-××××

藜麦中齐墩果酸含量的测定

高效液相色谱法

DeterminationofoleanolicacidinquinoaHPLC

(征求意见稿)

××××-××-××发××××-××-××实施

宁夏化学分析测试协会发

发

藜麦中齐墩果酸含量的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了藜麦中齐墩果酸含量的测定方法高效液相色谱法。

本标准适用于藜麦中齐墩果酸含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于

本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3方法原理

齐墩果酸在甲醇-盐酸溶液超声水解的方法下转化成齐墩果酸苷元，用高效液相色谱-紫外检测

器测定，以保留时间定性，外标法定量，以齐墩果酸苷元的含量来定量藜麦中齐墩果酸的含量。

4试剂与材料

4.1试剂

4.1.1甲醇：色谱纯。

4.1.2盐酸：分析纯。

4.1.3乙酸铵：优级纯。

4.1.4水为符合GB/T6682规定的一级水。

4.2试剂配制

4.2.1盐酸溶液（3mol/L）：量取250mL盐酸，用水稀释至1000mL，混匀。

4.2.2乙酸铵溶液（0.1mol/L）：称取7.7g乙酸铵，加水溶解，定容至1000mL，混匀，经0.45µm

微孔滤膜过滤后使用。

4.3标准品

齐墩果酸（C3OH4803，CAS：508-02-1），纯度≥98%。

4.4标准溶液配制

准确称取5mg（精确至0.01mg）齐墩果酸标准品，用甲醇溶解定容至10mL，即为500mg/L的

标准储备液。于-18℃冰箱中贮存。临用前将溶液回温至室温。

5仪器与设备

5.1高效液相色谱仪（HPLC）：配紫外检测器。

5.2分析天平：感量为0.01mg和0.1mg。

5.3电热恒温水浴锅：0℃～100℃。

5.4数控超声波清洗器。

5.5微孔滤膜：0.45µm。

5.6高速万能粉碎机：10000r/min。

6分析步骤

6.1试样制备与提取

藜麦样品经高速万能粉碎机粉碎成细粉末状，准确称取0.5g（精确至0.1mg）于250mL磨口锥

形瓶中，加入甲醇溶液80mL，3mol/L盐酸溶液20mL，混匀密封瓶口，超声提取20min（期间振摇

2-3次），再于沸水浴中冷凝回流水解1.5h，取出冷却，过滤提取液，吸取滤液经0.45µm微孔滤膜

过滤，待测。

6.2仪器参考条件

6.2.1色谱柱：C18（4.6×250mm，5μm）或性能相当者。

6.2.2流动相：0.1mol/L乙酸铵-甲醇（15+85）。

6.2.3检测波长：215nm。

6.2.4柱温：30℃。

6.2.5流速：1.0mL/min。

6.2.6进样量：10μL。

6.3标准曲线的制作

将标准溶液分别稀释配制成0mg/L、0.2mg/L、1.0mg/L、5.0mg/L、10mg/L、50mg/L、100

mg/L，依次由低浓度到高浓度进样检测，分别以质量浓度X