高效液相色谱法测定红细胞内氨基酸含量.pdf

(1979). studied.Thecorrectionvaluesof10structure [5]J.E.Duboisetal.,ibid.,194,121(1980). unitsforboilingpointsofstraightchainalkenes [6]吴烈钧，色谱，1(2),122(1984). werecalculatedbycomputer.Anequationforthe [7]F.Asingeretal.,Chem.Ber.,97.1555(1964). accuratecalculationoftheirretention indices is [8]L.Sojketal.,J.Chromatogr.,71,243(1972). proposed.Theretentionindicesof71C3-C13 （收稿日期：1985年5月） straightchainalkenesonsqualaneat86℃?and TheBoilingPoint-Structure-RetentionIndexRelation theboilingpointsof11C13strightchainalkenes ofStraightChainAlkenesWuLie-u, sandong werecalculatedbyusingtheequation.Thestan- lnstituteoChemistry,Jinan darddeviationsof△land△Tbwereequalto0.8 The-BoilingPoint-Structure-RetentionIndex indexunitand0.15℃respectively. relationofstraightchainalkenesonsqualanewas 高效液相色谱法测定红细胞内氨基酸含量 赵琼蕊 刘 华 朱无难 刘厚钰 蔡幼德 叶胜龙 上（海医科大学中山医院内科教研室及实验室） 提〔要〕作者采用国产梯度洗脱装置，并改良了以往报道的色谱条件，对人体红细胞内 23种游离氨基酸 包（括谷胱甘肽）进行了分离和定量测定。各氨基酸保留时间的天内变异系 数为0.17±0.09％，天间为0,21±0.12％ 均（数±SD ，这说明国产仪器的性能可靠且重现性 好。分析所得正常人红细胞内氨基酸值与文献报道基本一致。慢性肾功能衰竭和原发性肝癌 患者红细胞内多种氨基酸有显著变化。实验证明，生理盐水洗涤红细胞会使红细胞内的各种 氨基酸有不同程度的损失，在样品预处理过程中应予以注意。 近年来，人们发现在血液和组织器官的 洗脱系统。Knauer公司的荧光检测器，大 氨基酸的转运和交换过程中，血细胞尤其是 华仪表厂的台式自动平衡记录仪，上海计算 红细胞也具有十分重要的作用。因此有必要 技术研究所的色谱数据处理机。色谱柱为 研究生理和病理情况下红细胞内氨基酸变化 LichrosorbRP-18250mm×8mm（内径）， 的规律及其意义[1～3]。红细胞内氨基酸测定 所用试剂均为分析纯。详见早先报道[6]。 是一项比较困难的工作，因为红细胞内氨基 二（）色谱条件 酸种类较多，还有大量谷胱甘肽等物质常会 流动相：溶剂 “A”为甲醇：0.01M醋酸钠 干扰氨基酸的定量分析[4,5]。我们采用高效 缓冲液=80：20pH7.0，溶剂 “B”为甲醇： 液相色谱法 H（PLC)测定了包括谷胱甘肽在 0.01M柠檬酸三钠缓冲液=20：80PH6.7。 内的23种红细胞内氨基酸含量，并报告同时 梯度时间50分钟，包括0％至80％“A”40分 测定16例正常成年男性红细胞氨基酸含量的 钟 线（性），返回时间8分钟，平衡2分钟。 结果。应用本法研究原发性肝癌和慢性肾功 流量为1ml/min。 能衰竭患者的红细胞内氨基酸含量，发现一 三（）红细胞的分离和处理 些明显的变化。 抽取1ml静脉血以肝素抗凝，4000rpm