分子生物学复习 蛋白质化学课件.ppt

分子生物学复习3、DNA复制的忠实性DNA的半保留复制遵守严格的碱基配对规律RNA引物DNA聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能复制出错是有即时的校读功能(3’5’外切酶功能）DNA损伤的修复机制分子生物学复习DNA损伤的修复光修复光修复酶嘧啶二聚体非聚合状态(正常DNA)切除修复细胞内最重要和有效的修复方式碱基切除修复/核苷酸切除修复/错配修复重组修复复制后修复E.coliDNA重组修复的酶RecA和RecBCDDNA倾向差错合成诱导产生缺乏校对功能的DNA聚合酶（Ⅳ、Ⅴ)在DNA损伤部位进行复制而避免了死亡SOS修复DNA损伤广泛、紧急状况下整体动员而诱发的反应SOS修复系统=切除修复+重组修复+调控蛋白=Uvr（uvr）+Rec（rec）+LexA分子生物学复习切除修复碱基切除修复核苷酸切除修复错配修复切开识别、切除损伤部位磷酸二酯键DNA糖苷酶UvrA、UvrBMutH/MutS/MutL清除清除损伤DNA核酸内切酶UvrCDNA解旋酶II/SSB/核酸外切酶I合成DNA聚合酶合成DNA聚合酶Ⅰ(DNAPⅠ)DNA聚合酶ⅠDNA聚合酶III连接DNA连接酶连接DNA连接酶DNA连接酶DNA连接酶分子生物学复习（三）逆转录

1、反转录和反转录酶逆转录的概念（RNADNA）RNA为模板逆转录酶4种dNTP碱基配对的原则cDNA（互补DNA--不含内含子，只含外显子）逆转录酶(RNA依赖的DNA聚合酶)有三种活性：RNA为模板的DNA聚合酶RNAaseDNA为模板的DNA聚合酶分子生物学复习逆转录过程催化三种反应：RNA指导的DNA合成RNA水解DNA指导的DNA合成逆转录的意义RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能逆转录病毒（RNA病毒）癌基因：白血病病毒其他：艾滋病病毒（HIV）/鸡禽流感病毒/SARS基因工程获得目的基因的重要方法之一分子生物学复习七、RNA的生物合成复制和转录的区别引物需要RNA引物不需要引物分子生物学复习复制和转录的相同点模板DNA原料核苷三磷酸碱基配对碱基配对原则聚合酶依赖DNA的聚合酶合成方向5’3’产物多核苷酸分子生物学复习RNA转录的基本过程原核生物真核生物起始RNA聚合酶结合在转录模板的起始区域。DNA双链解开，其中的一条链作为转录模板。酶RNA聚合酶全酶(?2????)RNA-pol不与DNA分子直接结合转录因子互相结合生成复合物RNA聚合酶结合、转录相应的基因起始点辨认?70TFⅡD（RNA-polⅡ）启动序列-35区的TTGACA-10区的TATAAT-25bpTATAInr起始复合物DNA-RNApolDNA-RNApol-各种TF分子生物学复习原核生物真核生物延长转录-翻译过程偶联转录、翻译过程分开转录空泡RNA-pol（核心酶）····DNA····RNA酶?亚基脱落核心酶作用NTP聚合，RNA链延长RNA-polⅠ、Ⅱ、Ⅲ作用分子生物学复习原核生物真核生物终止RNA聚合酶在DNA模板上停顿转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来依赖Rho(ρ)因子的转录终止ρ-因子：ATP酶/解旋酶转录终止的修饰点AATAAAGTGTGTG和转录后修饰密切相关非依赖Rho因子的转录终止茎环结构3’末端都个连续的U使转录终止分子生物学复习2、RNA聚合酶原核生物RNA聚合酶核心酶α2ββ’核心酶参与转录全过程决定哪些基因被转录结合底物，形成磷酸二酯键（催化）结合模板（开链）σ识别起始点启动子（延长时脱落）???????????分子生物学复习真核生物RNA聚合酶种类细胞内定位转录产物对鹅膏蕈碱反应对利福霉素反应Ⅰ核仁45S-rRNA不敏感不敏感Ⅱ核质hnRNA，U1-5snRNA高度敏感不敏感Ⅲ核质tRNA,5srRNA,U6snRNA,scRNA中度敏感性不敏感线粒体转录小基因组DNA活性低叶绿体分子生物学复习真核生物RNA聚合酶亚基数目13-15个共同亚基