2025届高三生物一轮复习课件：基因工程的基本操作程序.pptx

【新教材?选择性必修三】2024【基因工程】

概念图

1.概念:按照人们的意愿，把一种生物的某种出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，（定向/不定向）地改造生物的遗传性状。2.别名:。3.原理:。4.操作对象:。5.操作水平:。6.操作环境:生物（体内/体外）进行7.结果：。8.优点：（1）。（2）等。基因重组DNA分子水平基因拼接技术或DNA重组技术基因体外创造出符合人们需要的生物类型和生物产品基因定向定向改造生物性状（目的性强）克服远缘杂交不亲和的障碍一.基因工程原理

【探究】人的胰岛素基因能通过拼接并在受体细胞大肠杆菌中表达出相同蛋白质--胰岛素的理论基础：（1）大肠杆菌和人的遗传物质都是。（2）不同生物的DNA分子能够拼接在一起，原因是。（3）同一种基因在不同生物体内表达出来的蛋白质相同，因为。（4）遗传信息的传递都遵循。(5)为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？。DNA中心法则基因的组成、空间结构和碱基互补配对方式相同所有生物共用一整套遗传密码①基因是控制生物性状的独立遗传单位②遗传信息的传递都遵循中心法则③生物界共同一套遗传密码一.基因工程原理

工具工具酶分子运输车：。（１）。（２）。限制酶ＤＮＡ连接酶运载体【易错警示】工具酶≠工具质粒λ噬菌体的衍生物动植物病毒二.基因操作基本的工具

1.限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)原核生物数千特定核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端二.基因操作基本的工具

教材隐性知识：(1)源于选择性必修3P71“旁栏思考”：①原核生物中存在限制酶的意义是什么？原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保证自身安全，防止外来病原物的危害。②限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰（甲基化），使限制酶不能将其切开。二.基因操作基本的工具

限制酶切质粒二.基因操作基本的工具

DNA连接酶连接二.基因操作基本的工具

重组质粒二.基因操作基本的工具

1.三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种酶的识别序列与切割位点，你能画出他们的黏性末端吗？有什么特点？

用两种不同限制酶切割，形成相同的黏性末端(同尾酶：识别的靶序列不同，但是酶切后形成的黏性末端相同)进一步思考：同尾酶切割形成的末端通过DNA连接酶连接后，该序列还能再被原来的酶识别和切割吗？

用同一种限制酶切割目的基因的两侧，会出现目的基因自身环化的情况

思考：用同一种限制酶切割后，会出现哪些连接情况？目的基因—目的基因、目的基因自身环化、质粒—质粒、质粒自身环化、目的基因—质粒、目的基因—质粒反向连接目的基因片段质粒

思考：2.用两种限制酶切割后，会出现哪些连接情况？目的基因—目的基因、质粒—质粒、目的基因—质粒用不同的限制酶切割：可以防止目的基因自身环化、质粒自身环化、目的基因和质粒反向连接（或保证目的基因和质粒正确连接）目的基因片段质粒

例2.①用图1中的质粒和图2中的外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是。SmaⅠ会破坏质粒中的抗性基因以及破坏目的基因

②构建重组质粒时，最好选择限制酶BamHⅠ、HindⅢ处理质粒、外源DNA，这样做的目的是__________________________________________。确保目的基因与质粒的定向连接

③选择限制酶切割位点的基本原则：A.切割目的基因时：。B.切割质粒