高三生物一轮复习课件第44讲基因工程的基本工具和基本操作程序.pptx

Addupeverythingwhatyoulikeandwhatyouwant2025,朝着更温暖的方向前进第44讲基因工程

title1.举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用改善了人类的生活品质。2.概述人们根据基因工程原理,进行蛋白质设计和改造,可以获得性状和功能更符合人类需求的蛋白质。3.举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程。4.举例说出日常生活中的转基因产品。课标要求

考点1重组DNA技术的基本工具

1.基因工程概念解读目的基因基因重组分子

拼接的基础①DNA的基本组成单位相同（四种脱氧核苷酸）表达的基础②都遵循碱基互补配对原则③DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构①基因是控制生物性状的结构与功能单位②遗传信息的传递都遵循中心法则③生物界几乎共用一套遗传密码问题:不同生物的基因为什么能拼接？为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达?1.基因工程概念解读

2.基因工程的基本工具（1）限制性内切核酸酶（也称“限制酶”）来源特点结果主要来自识别双链DNA分子的使磷酸二酯键断开产生和平末端原核生物特定核苷酸序列黏性末端

写出下列限制酶切割形成的末端序列BamHⅠEcoRⅠ__________________________HindⅢBglⅡ_________________________-G-CCTAG--G-CTTAA--A-TTCGA--A-TCTAG-or-GATCCG-or-AATTCG-or-AGCTTA-or-GATCTA-【思考】同种限制酶切割产生的黏性末端是否相同？不同限制酶切割产生的黏性末端是否一定不同？相同可能会相同考点训练

2.基因工程的基本工具（2）DNA连接酶作用类型E.coliDNA连接酶将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的来源：T4噬菌体功能：缝合和平末端来源：大肠杆菌功能：只缝合黏性末端磷酸二酯键黏性末端分子缝合针T4DNA连接酶

限制酶与DNA连接酶的关系：DNA连接酶与DNA聚合酶的关系：相同点——作用位点都在磷酸二酯键不同点——DNA聚合酶DNA连接酶DNA连接酶DNA聚合酶：单个核苷酸与DNA片段DNA连接酶：DNA片段与DNA片段DNA聚合酶作用需要模板，而DNA连接酶不需要（2）DNA连接酶

名称作用部位作用结果限制酶DNA连接酶DNA聚合酶DNA(水解)酶解旋酶磷酸二酯键碱基对之间的氢键将DNA切成两个片段磷酸二酯键将两个DNA片段连接为一个DNA分子磷酸二酯键将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端磷酸二酯键将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸将双链DNA分子局部解旋为单链（2）DNA连接酶

2.基因工程的基本工具（3）载体种类特点（常用载体）：环状双链DNA分子、动植物病毒等携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中进行，或整合到上，随受体DNA同步复制有限制酶切位点质粒自我复制作用噬菌体常有特殊的基因，便于重组DNA分子的筛选标记受体DNA一个至多个携带外源DNA片段进入受体细胞

大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成,也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。1.切割质粒的限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。()2.限制性内切核酸酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶。()提示:质粒不是工具酶,是工具。3.E.coliDNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端。()4.DNA聚合酶和DNA连接酶都能催化磷酸二酯键的形成。()5.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选的标记基因。()正误辨析质粒不是工具酶,是工具。质粒上常有抗生素抗性基因等特殊的基因作为标记基因,而非抗生素合成基因。E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端,而T4DNA连接酶能连接平末端和黏性末端。×××√×

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