结核病免疫学诊断新进展.pptx

河南省胸科医院

中心实验室

张国龙结核病免疫学诊断新进展

March24,2004,WorldTBdayWouldyoumindtocleanthisDirtyairbyyourlung?

结核病人的全球分布

结核菌形态学改变正常结核菌

FIG.1.?EffectofanaerobiccultureonthemorphologyofM.?bovisBCG,M.?tuberculosis,andM.?smegmatis.(A)LongitudinalsectionofanM.?bovisBCGbacillusculturedanaerobicallyfor6?monthsshowingpronouncedcellwallthickening(somecytoplasmicdehydrationisevident).(B)TransversesectionsofM.?bovisBCGbacilliculturedanaerobicallyfor6?months.(C)Lackofcellwallthickeninginlow-ODaerobicallyculturedM.?bovisBCGbacilli.(D)NLSPCM.?bovisBCGbacillishowingtheabsenceofcellwallthickening.(EandF)CellwallthickeninginM.?tuberculosisfollowinganaerobicculturefor1?monthundermineraloil.(G)AerobicallyculturedM.?smegmatis.(H)M.?smegmatisbacilliexhibitingcelllysisfollowing35?daysofanaerobicculture.细胞壁增厚

细菌变小,呈颗粒状或椭圆状37c,4monthswithoutshakinginaloosecapedTube.

人体免疫

结核性肉牙肿模型

ESAT-6抗原的研究开发谢谢大家！课题进展报告

一）课题立项背景和意义课题２００２年８月立项，获卫生人才科技创新项目经费资助１５万元。

全球结核病疫情感染人数2０亿年新增加患病人数8００万年结核病死亡人数２００万

中国结核病疫情2000全国流调感染率44.5%，结核患病率367/10万涂阳患病率122/10万估计全国有结核病人５００万TB，Averagedeathage55.2Y

结核病诊断的冰山现象感染人群01活动性病人02总人口03

大量病人的诊断需要依靠结素试验

存在的主要问题１，PPD不能区分卡介苗接种和结核菌感染。２，我国卡介苗接种率超过９０％。３，存在有大量过诊过治现象TB，Averagedeathage55.2Y

９８年结核菌全基因测序的公布，为新诊断试剂的开发带来了希望！

BCG在传代过程中删除了ESAT-6等基因，也就意味着，用它作诊断试剂，可以排除

卡介苗接种的干扰。01添加标题BCG02添加标题ESAT-6CFP1003添加标题RD1区04添加标题TB

二）课题已经取得的进展一，利用转基因技术，表达和纯化出了ESAT-6蛋白。二，动物实验三，人体试验。_x0008__x0008__x0008__x0008__x0008__x0008__x0008_

一，利用转基因技术，表达和纯化出了ESAT-6蛋白。１，质粒构建ESAT-6基因插入Vector;pQE30Primer’5-TTGGGATCCATGACAGAGCAG-3;:5-ATAAAGCTTCTATGCGAACATCC-3.PCRampliWcationsweredonewith35cyclesat94°Cfor1min,66°Cfor1min,and72°Cfor1min,followedbyaWnalextensionstepat72°Cfor2min,

一，利用转基因技术，表达和纯化出了ESAT-6蛋白。2，筛选克隆

一，利用转基因技术，表达和纯化出了ESAT-6蛋白。３７度封闭式摇床3，大量培养转基因大肠杆菌添加标题添加标题

一，利用转基因技术，表达和纯化出了ESAT-6蛋白。添加标题４，蛋白分离与纯化