输血相容性检测.ppt

输血相容性检测;内容提要;红细胞抗原抗体检测技术;盐水介质凝集试验;措施：玻片法-便于显微镜观测成果

试管法-合用于不一样温度、便于洗涤

反应温度：4～22℃

临床意义：盐水凝集试验阳性，并在37℃也有活性的抗体故意义。室温有活性，37℃无活性者临床意义不大。

长处：简便、快捷、直观。

缺陷：不能发现不完全抗体。;抗人球蛋白试验是1945年由Coombs等人建立的，又称Coombs试验。抗人球蛋白试验的建立在血型血清学上有着非常重要的意义。

分为直接抗人球蛋白试验（DAT）和间接抗人球蛋白试验（IAT）。;IgG类血型抗体（重要是免疫抗体，如Rh血型抗体）分子量小，与红细胞对应抗原结合后，在盐水介质中不出现肉眼可见的凝集反应，称之为不完全抗体，但在加入抗-IgG后，以其搭桥作用则可出现凝集反应。

补体成分在体内被红细胞抗原抗体复合物激活后来，结合在红细胞表面。在体外含补体的多克隆抗体，或抗C3b、抗C3d等单特异性抗体与补体致敏的红细胞反应，使之凝集也称为抗球蛋白试验。;DAT是检测体内致敏红细胞的一种措施，用于检查红细胞与否已被不完全抗体所致敏，尤其是IgG和C3d包被的红细胞。

应用：

HDN和自身免疫性溶血性贫血的诊断

红细胞被药物抗体致敏的检查

急性和迟发性溶血性输血反应的检查;;IAT是检测血清中不完全抗体的一种，用于测定在体外能引起红细胞致敏的抗体。

应用：

血型的鉴定，如Rh血型

抗体的检出和鉴定

交叉配血;;原理：红细胞表面有丰富的唾液酸，带有负电荷，是红细胞互相排斥的原理。蛋白水解酶能消化破坏这种唾液酸，减少红细胞表面的负电荷以及红细胞之间的排斥力，缩短了红细胞之间的间距，使IgG抗体分子能与有对应抗原的红细胞产生凝集

常用的酶（0.5%）：菠萝酶、木瓜酶、胰酶、无花果酶;长处：

酶法能明显增强某些抗原抗体系统的反应活性，Rh和Kidd系统最明显

缺陷：

①酶法处理RBC，蛋白酶会使RBC的抗原构造破坏和变性（M、N、Fya、Fyb）

②操作繁复，少数人对酶液过敏;原理：

凝聚胺是一种多价阳离子聚合物，在溶液中有多种阳离子基团，能中和红细胞表面的负电荷，并借助正负电荷的作用，引起红细胞的非特异性凝集。

当红细胞与血清在低离子介质中孵育后，IgG抗体与红细胞上对应的抗原结合在凝聚胺的作用下发生凝聚。凝集和凝聚在表面上不能辨别，再加入枸橼酸钠重悬液，枸橼酸根的负电荷与凝聚胺上的正电荷中和，非特异性凝集现象消失，而真正的凝集不会消失。;;微柱凝胶试验;微柱凝胶免疫反应的本质：凝集反应;微柱凝胶试验;几种措施的比较;抗体的筛选及鉴定;抗体筛选措施;成果的判读与解释;抗体鉴定;抗体鉴定;交叉配血;缗钱状凝集;抗筛和配血成果分析;抗筛和配血成果分析;抗筛和配血成果分析;抗筛和配血成果分析;抗筛和配血成果分析;案例分析;案例分析