绵羊痘病毒、山羊痘病毒及羊口疮病毒多重PCR检测方法的建立和应用.pdf

， ， （）： ２０１７ ３８３ １１１５ Ｐｒｏ ｒｅｓｓｉｎＶｅｔｅｒｉｎａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｇ ｙ 绵羊痘病毒、山羊痘病毒及羊口疮病毒 多重ＰＣＲ检测方法的建立和应用 １ １ ２ １ １   何亚鹏 ，张 琪 ，史怀平 ，付明哲 ，许信刚 　 （ 西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌 ； 西北农林科技大学动物科技学院，陕西杨凌 ） １． ７１２１００２． ７１２１００ 摘 要：为了建立鉴别绵羊痘病毒（ ）、山羊痘病毒（ ）和羊口疮病毒（ ）的多重 检 ＳＰＰＶ ＧＴＰＶ ＯＲＦＶ ＰＣＲ 　　 　 测方法，针对 中 种病毒的基因组序列，合成了 对引物，通过优化多重 反应条件，建立了鉴 ＧｅｎＢａｎｋ ３ ３ ＰＣＲ 别检测 种病毒的多重 方法。特异性试验表明，应用该方法可分别扩增出 种病毒对应的目的片段， ３ ＰＣＲ ３ 对大肠埃希菌、沙门菌、猪圆环病毒 型（ ）、猪细小病毒（ ）、 细胞、正常羊组织的 和灭菌 ２ ＰＣＶ２ ＰＰＶ Ｖｅｒｏ ＤＮＡ 双蒸水均无扩增；敏感性试验表明，该方法最低检测量分别为 ／ 的绵羊痘病毒、 ／ 的山 ３０．４６ｐｇ Ｌ ２８．９ｐｇ Ｌ μ μ 羊痘病毒和 ／ 的羊口疮病毒基因组 ；应用本方法对 份临床病料进行检测，结果与其他已 ２６．９４ｐｇ Ｌ ＤＮＡ ８５ μ 建立的单项 检测方法结果一致，说明该方法可以用于临床上 、 和 的鉴别诊断。 ＰＣＲ ＳＰＰＶ ＧＴＰＶ ＯＲＦＶ 关键词：多重 ；绵羊痘病毒；山羊痘病毒；羊口疮病毒；检测 ＰＣＲ 　　 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ８５２．６５９．１ Ａ １００７５０３８２０１７０３００１１０５ 绵羊痘病毒（ ， ）和山羊痘 此，本试验建立一种可以同时检测和鉴别 、 Ｓｈｅｅ ｏｘｖｉｒｕｓ ＳＰＰＶ ＳＰＰＶ 　　 ｐｐ 病毒（ ，