《山羊痘病毒属病毒血清学抗体ELISA检测方法》征求意见稿.pdf

ICS11.220

B41

团体标准

T/CVMAXXXXX—XXXX

山羊痘病毒属病毒血清LI

学抗体ESA检测

方法



tepo

Goaxvirusisviralserolal

ogicantibodyELISA

（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国兽医协会发布

T/CVMAXX—XXXX

山羊痘病毒属病毒血清学抗体ELISA检测方法

1范围

本文件规定了山羊痘病毒属病毒抗体的酶联免疫分析检测方法。

本文件适用于酶联免疫法检测动物血清中的山羊痘病毒属抗体，可以动态监测抗体消长变化，适用

于评估养殖场山羊痘病毒属疫苗免疫状况。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NYT4/51-201兽医诊断样

6品采集、保存规

与运输术范

技执行。

3试剂与耗材

3.1山羊痘病毒属病毒重组蛋白N抗原，见附录A。

见

3.2阴性对照，附录B.1。

33阳性对照，见附录B.2.。

3.4包被缓冲液，见附录C.1。

3.5封闭液，见附录C.2。

3.7酶结合物稀释液，见附录C.3。

3.8样品稀释液，见附录C.4。

3.925倍浓缩洗涤液，见附录C.5。

3.10显色液A，见附录C.6。

3.11显色液B，见附录C.7。

312终止.液，见附录C.8。

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4器材与设备

4.1酶标仪。

4.2分析天平。

机

4.3洗板。

4.437℃温箱。

4.52℃～8℃冰箱，－20℃冰箱。

4.6单道微量移液器（0.5µL～10µL；10µL～100µL；20µL～200µL；100µL～1000µL）。

4.7多道移液器（300µL）。

4.8酶联反应板。

4.9血清稀释板：96孔一次性U型血凝板或96孔细胞培养板。

4.10一次性注射器（5mL～10mL）。

5实验前准备工作

5.1样本采集及处理

采集静脉血时，每只牛使用一个注射器。建议进行静脉无菌采血，不少于2m。室温静置于斜面2h，

L

待血液自然凝固后，置2℃～8℃冰箱中放置不少于2h，4000r/min离心10min。用移液器小心吸出

上层血清。

5.2血清样本的存放与运送

血清样本若在一周内检测，可置2℃～8℃条件下保存。若超过一周检测，应置于-20℃以下冷冻

保存。运输时注意冷藏，确保样品有效。采集的血清样本可用冰袋或保温桶加冰密封等方式运输，运输

时间应尽量缩