拟南芥细胞壁关联蛋白激酶融合表达及多克隆抗体的制备.pdf

维普资讯 ???? 植物 生理学通讯 第 ??卷 第 ?期 ，????年 ??月? 拟南芥细胞壁关联蛋白激酶融合表达及多克隆抗体的制备? 李少琼?徐朗菜? 陈伟华? 谢静红? 凌永贞? 杨志敏?? 南京农业大学?生命科学 学院，?动物医学 院，南京 ??????? ??????????????????????????? ????·????????????????????????????????????????????·? ???????????????????????????????????????? ???????·??????，???????—????，????????—????，????????—?????，?????????—?????，????????—????·? ????????????????????，。??????????????????????????????，????????????????????????????????????????????????????? 提要 为了研究拟南芥中细胞壁关联蛋白激酶 ???????基因功能，通过??—???得到 ?????????片段 ，将其亚克隆至? ??????表 达载体中进行表达，获得融合蛋 白。用纯化 的融合蛋 白??????????免 疫家兔 ，得到抗 ????抗体 。??????????? 结果显示该抗体能特异识别在原核表达系统内表达的抗原，抗????的抗体对拟南芥中的????蛋白具有高度的特异性。? 关键词 ????基因；拟南芥；原核表达；多克隆抗体? 细 胞 壁 关 联 蛋 白激 酶 ??????????．??????????? 及相关基 因特性还??? 乏足够 的了解???。为了深入? ??????，????是近年来新发现的一种类受体蛋 白? 研 究其功能，我们将 ????基因片段在大肠杆菌? 激酶??．一?。已知在拟南芥细胞中被鉴定的 ???胞? 中进行 了表达 ，表达蛋 白经 电泳纯化后作为抗原? 质外结构域具有类似于哺乳动物表皮生长因子的重? 免疫新西兰 白兔 ，制 备出了相应 的多克隆抗体 。? 复序列，它们能与细胞壁 内果胶组分紧密结合 ???。? 这些结果可供进一步研究 ???和相关基因的功能? ???分子除上述特征结构外，还含有一个与细胞? 时 参 考 。? 质膜连接的跨膜区 ，以及 定位于胞质 内一个 ???／? 材料与方法? ???激酶活性 的结构域???。此外 ，有报道认为 ，? ???蛋白结构域在细胞壁中还能与一组富含有甘? ? 试剂和材料? 氨酸残基的蛋 白质相结合 ，后者能启动胞质 内其? 大肠杆菌 ????、???????????质粒 ???????