微生物第二章概要.ppt

微生物的分离和纯培养（重点） 显微镜和显微技术（了解） 显微镜下的微生物（自学） 生物的大小 放大倍数：能够放大观察物体的大小 分辨率：能够辨别两点之间最小距离的能力 一、光学显微镜 1.历史 光学显微镜分为单式显微镜和复式显微镜 单式显微镜只有一个镜片 复式显微镜有几个镜片组成物镜 罗伯特·胡克的显微镜 复式显微镜成像原理 镜座 支架 载物台 调节螺旋 物镜 目镜 聚光镜 虹彩光圈 光源 光学系统 机械装置 二、光学显微镜的组成 单目生物显微镜 双目生物显微镜 实验室用（荧光）双目生物显微镜 GAILEM/CTV型彩色电视生物显微镜 XDS-2倒置生物显微镜 IBE2000系列倒置荧光显微镜 XD-101型倒置生物显微镜 XJZ-6A型正置式透反、正置式反射金属金相显微镜 XTL20系列连续变倍体视显微镜 XTS30 连续变倍摄影体视显微镜 XPT-7型偏光显微镜 XPT-7型偏光显微镜是对具有双折射性的晶体进行研究的必备仪器，在地质、化工、纺织和医疗部门中，用于分析岩矿，研究晶体，纤维的光学性质，另外，还能供大专院校师生作教学、实验之用 XTJ-30高清晰度显微图像电脑分析系统 YS2 生物显微镜NIKON 1.普通光学显微镜 1.1物镜 显微镜中最重要的组成部分，其他部分的作用 是使物镜能够充分发挥其性能，得到清晰的图象 分辨率=0.5λ/nsinθ λ 波长 Nsinθ=NA（numberal aperture) 数值孔径 n 折射率 θ 物镜镜口角半数 物镜的放大倍数越大，数值孔径愈大 油镜（90×） 0.65~0.95 高倍镜(40×) 0.65~0.85 低倍镜(10×) 0.25~0.30 折射率 水 1.0 空气 1.33 香柏油 1.52 从物镜本身的结构来说,加大物镜透镜的直径和缩短它的 焦距,可以加大θ的角度,从而提高数值孔径和分辨率。 但是透镜的直径的加大和焦距的缩短都有一定的限度。 放大倍数很高的物镜，数值孔径很大，但是工作距离很 短，使用很不方便。为了提到放大率，物镜是由几个镜片 组成，低倍物镜一般至少有4个镜片，高倍物镜通常有 8个镜片，至少有两种不同的玻璃组成。 物镜需要校正各种镜头偏差，包括球面差、彗星效应 像散现象、视野弯曲、色差等 物镜都表明它的放大倍数，数值孔径，焦距和校正镜头的 偏差 1.2 目镜 目镜起到二次放大的作用,可以安装测微尺 放大倍数 10×, 12.5×, 15×, 20× 一般显微镜的标准目镜是10× 目镜只能起放大作用,不能提到分辨率 显微镜的分辨率与放大倍数有关,但是二者有所不同 而提高分辨率是最重要的! 例如:显微镜总的放大倍数= 物镜放大倍数×目镜放大倍数 20×20=10×40 : 10×40分辨率好 理论上显微镜的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放 大倍数的乘积,但实际上小些,根据实际经验,有效放大 倍数大致是数值孔径的1000倍. 例如用45×物镜,具体条件下的数值孔径是0.85,如果 用20×目镜就超过有效界限,用15×目镜效果较好 2 暗视野显微镜 利用特殊的聚光器实现斜射照明,给样品照明 的光不直接穿过物镜,而是由样品反射或折射 后再进入物镜. 适用于观察透明样品的轮廓 如细菌的运动,线虫的结构 梅毒螺旋体等 暗视野显微镜下苍白密螺旋体 在暗视野显微镜下，苍白密螺旋体为直的密螺纹螺旋体。（暗视野，放大1000倍） 3 相差显微镜 1953. f.塞尔尼克.荷兰.论证相衬法，特别是研制相差显微镜. * 第二章 微生物的纯培养和 显微技术 计划课时：4 微生物的分离和纯培养 显微镜和显微技术 培养物(culture)：在微生物学中，在人为规定的条件下培养、 繁殖得到的微生物群体 纯培养物(pure culture)：只有一种微生物的培养物 菌落（Colony ） 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或者内部生长、繁殖到一定程度所形成的肉眼可见的，有一定形态结构的子细胞生长群体。 菌苔（lawn） 第一节 微生物的分离和纯培养 一、培养基（culture medium)的概念及配制原则 培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生 代谢产物的营养基质 配制原则 营养成分 C源 N源 无机盐 生长因子 水 营养成分应该