HPLC-MS同时测定小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量.pdf

第39卷第 17期 2014年9月 -警烹烹a杂triaM~,志dica VSoe1p．3t9em，bIsesrue，201714 HPLC．MS同时测定小 鼠血浆 中青蒿素、 青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪 内酯的含量 闵青 ，卢炜 ，Y-~7L ，张东。，周田彦 ，李良 (1．北京大学 药学院，北京 100083； 2．首都医科大学 中医药学院，北京 100069；3．中国中医科学院 中药研究所，北京 100700) [摘要] 青蒿素是一种常用的抗疟药，但青蒿中其他组分的药效作用很少被考察。研究发现 ，当青蒿中的青蒿乙素、青 蒿酸、东莨菪内酯3种组分与青蒿素按照质量比为 1：1：1：1的比例在小鼠体内考察药效时，与等剂量青蒿素单用组相比可以 起到显著的抗疟增效作用。建立血浆中同时检测青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯4种组分含量的HPLC—MS方法，有 助于这种增效现象在药动学层面研究的进一步开展。采用Agilent公司1200-6130液质联用系统，电喷雾电离源，正离子和负 离子检测方式，SIM模式；色谱分离采用AgilentZorbaxSB—C，色谱柱 (2．1mm×150mm，5 m)，流动相乙腈 ．5％乙酸水溶液 (60：40)，流速0．3mL·rain～，柱温为40．0℃，进样量5 L。结果显示 ，4组分血浆浓度在5—3000Ixg·L 呈现 良好线性关 系，方法专属性、准确度、精密度良好 ，无基质效应。该方法适用于小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量 测定，可用于开展4组分小鼠体内药物动力学研究。 [关键词] 青蒿素；青蒿乙素；青蒿酸；东莨菪内酯；液质联用 世界卫生组织为了延缓疟原虫青蒿素类药物抗 MS，首次建立了同时检测小 鼠血浆 中青蒿素、青蒿 药性的产生，自2001年开始推荐使用基于青蒿素类 乙素、青蒿酸、东莨菪内酯4组分的分析方法。本方 抗疟药的联合治疗方案 (artemisinin-basedcombina— 法专属性、准确度、精密度良好，无基质效应。 tiontherapies，ACTs)。ACTs目前在全球疟疾治疗 1 材料 中发挥着重要作用 ¨J。为了更好利用我国的青蒿 AR11401／10万精密电子天平 (上海奥豪斯仪 资源以及发展新型天然 ACTs组合药物，我国学者 器有限公司)；AnkeTGL．16G高速离心机 (上海安 开展了青蒿多组分配伍抗疟研究。纪晓光等发现以 宁科学仪器厂)；Agilent1200．6130液质联用系统， 青蒿素、青蒿酸、青蒿乙素和东莨菪内酯 1：1：1：1的 配备电喷雾离子源，单四级杆质谱检测器(美国Ag— 比例配伍后，青蒿素用量仅为原剂量的1／4，抗疟药 ilent科技有限公司)。青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和 效与青蒿素单用组相当 4。。为了进一步明确 4组 东莨菪内酯对照品从黄花蒿ArtemisiaannualL．药 分配伍增效的机制，需要进一步开展药物相互作用 材中分离得到。所有对照品经uV，IR，MS，H，”C— 研究。建立同时检测4种组分在小鼠体内血药浓度 NMR进行结构确证，并通过HPLC—DAD面积归一化 的可靠分析方法，是揭示青蒿组分在药动学层面可 法测定，纯度大于98％。色谱乙腈购 自德国Merck 能存在的增效原理研究的必要手段，可以为明确增 公司，纯净水购 自北京屈臣氏蒸馏水有限公司，其余 效机制提供依据。本研究采用了高效灵敏的HPLC一 试剂均为分析纯。 健康KM小鼠，雄性，体重 18～22g，血检无感 [收稿 日期] 2013-08-29 染。由中国中医科学院中药研究所 GLP中心动