中学联盟广东省肇庆市实验中学高中生物（理）选修3课件：2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 (共21张PPT).ppt

【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ） A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 B × A细胞 B细胞 人工诱导 1.1 动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。 BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤） （一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 （二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 ① 例5、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗？　 　。原因是　　　　 ____________________________________________________________。（2）图中②为　　 　过程，常用　　　 　作为诱导剂。该细胞继承了_____________________　 　，因此不仅能分泌　　___________，还有　　 　　本领。 不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法 获得产生专一抗体的B淋巴细胞 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 大量增殖 制备单克隆抗体 （3）该方案的目的是_________________________。 番茄-马铃薯（理想图） 有梦想，才会有创造！ A细胞 B细胞 人工诱导 1.1 动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。 病毒颗粒黏 附细胞表面 细胞膜连接 细胞膜被 病毒颗粒穿通 细胞融合、形成杂种细胞 诱导 方法 物理法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 原理： 离心、电激、振动 聚乙二醇(PEG) 细胞膜的流动性 1.2 动物细胞融合的诱导 丧失感染性,保留融合活性 1.2 动物细胞融合的诱导 病毒颗粒黏 附细胞表面 1.3 动物细胞融合技术的意义和应用 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 ①意义： ②应用： 制备单克隆抗体（最主要的应用） 1.4 比较植物体细胞杂交和动物细胞融合 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原 理 融合前处理 诱 导 方 法 用 途 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 物理、化学方法 物理、化学、 灭活的病毒 获完整植株 主要用于制备 单克隆抗体 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 产量低 纯度低 特异性差 灵敏度低 1975年的实验室 一个美丽的发现 每个B淋巴细胞——只能分泌一种特异性抗体 怎样大量获得单一抗体 进行无性繁殖（克隆） 体外培养的细胞不能无限增殖 ？ 癌细胞 但是 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 动物细胞融合技术 单克隆抗体 你的设想 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤） （一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 （二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 杂交 细胞 灭活的病毒等手段 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 经免疫的小鼠 提取 杂交瘤细胞 第一次筛选 用特定的选 择性培养基 第二次筛选 能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞 体外培养 注射到小鼠腹腔 提取单克隆抗体 2.2 单克隆抗体的应用 ①诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点： 特异性强 灵敏度高 并能大量制备 “生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物 单抗导向，药物为弹头 ②治疗疾病和运载药物 主要用于癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。 两个过程 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒 一个新细胞－－杂交瘤细胞 一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优