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高效液相色谱法测定样品中的2甲4氯纳 摘要：本文介绍了反相高效液相色谱法测定样品中2甲4氯纳含量，并与气象色谱法测定的结果进行了比较，由于样品前处理简单 HPLC 法提高了样品的检测速度。该方法的变异系数cv=0.34%，平均回收率为：100.1% 线性相关系数r=0.9998。 关键词：高效液相色谱法 2甲4氯纳 定量分析 一、前言 2甲4氯纳是一种低毒除草剂，属苯氧乙酸类选择性除草剂，是2甲4氯的纳盐，属强急性化合物，直接在气相色谱上分析时，主峰严重拖尾。同时，由于在生产中产生的副产物，如2-甲基苯氯乙酸纳、2-甲基苯酚等的功能绕，直接采用气相色谱法分析不可能。HG2610-94中规定用重氮甲烷对其进行衍生化反应后，以邻苯二甲酸二甲酯作内标物，在5%阿皮松L的柱子上，对2甲4氯苯氧乙酸进行色谱分离定量。此方法中所使用的重氮甲烷具有一定的毒性及爆炸性，对试验者有一定的危险，所以，本文通过调节流动相的PH值，使2甲4氯纳以酸的形式存在，直接采用反相HPLC法对其进行分析检测。 二、试验部分 1 仪器 岛津LC-10A 高效液相色谱，具有可变波长紫外检测器，色谱工作站。 试剂 甲醇（HPLC级） 水 二次重蒸水 2甲4氯酸标样 99.0% 操作条件 色谱柱：SIMADZU VP-ODS 150mm×4.6mmID 粒径5m 孔径100A 缓冲液：0.1mol／L乙酸溶液，PH=2.8 流动相：甲醇：缓冲液=60：40（V／V） 检测波长：230nm 流速：1.0ml/min 进样量：5ul 保留时间：约为13.5min 溶液配制 标准溶液配制：准确称取已知含量的2甲4氯酸标准品0.04g（精确至0.0002mg）于25ml容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，超声脱气，充分摇匀，用0.45m针式过滤器过滤备用。 样品溶液配制：准确称取含2甲4氯约为0.04g（准确至0.0002mg）的样品于25ml容量瓶中，配制同上。 测量及计算 按上述条件，待仪器稳定后，连续进数针标准溶液，直至相邻两针的响应值的相对偏差不大于1%时，即可进样测定。根据相邻两针标样溶液和试样溶液峰面积之和的平均值，2甲4氯纳质量百分含量X(%)按下式计算： X=(m1×P×r2)／(m2×r2)×1.11×100% 式中：m1--------2甲4氯酸标样质量，g； m2--------试样质量，g; r1--------标样溶液中2甲4氯酸峰面积之和的平均值； r2--------试样溶液中2甲4氯酸峰面积之和的平均值； P-----标样的纯度，%； 1.11------相当于1.0的2甲4氯的含量 4.4允许差 两次平行测定结果绝对值之差不得大于0.2%。 三、结果与讨论 3.1方法的选择 由于2甲4氯酸是弱酸，2甲4氯酸纳是弱酸强碱盐，因此通过调节流动相的PH值，使2甲4氯钠在流动相中以酸的形式存在，降低样品的极性，使得在反相高效液相色谱上分成为可能。 从标样普图可以看出：该峰峰形对称，保留时间适中，分辨率较高，所以可采用高效液相色谱法对其进行含量测定，色谱图见图-1。 3.2流动相PH值的选择 正如5.1所述，采用HPLC分析的关键是流动相要有一定的酸度，通过比较PH值小于3.0即可保证2甲4氯钠盐在流动相中以酸的形式存在。同时，考虑到PH＜2时对反向柱的洗脱太严重，影响柱子的寿命，因此PH值的选择保证样品转换为酸时较高的PH值，在本方法中缓冲液的PH值为2.8。 3.3柱子的选择 从柱子上考虑，我们选择了150mm4.6mmID,粒径为10m的柱子，通过试验比较，我们选用畸形对称、出峰时间适中，可以满足快速有效分析样品的要求。 3.4方法的线性范围确定 配置高浓度标样溶液，8.3mg/ml，按2、5、10、50、100、500倍稀释标样溶液，在上述操作条件下，进样量为5ul。得相应峰面积见（表-1）： 以浓度为横坐标（X轴），响应值为纵坐标（Y轴），得回归方程为Y=6E+06X相关系数为r=0.9998，方法的线性范围宽，线性关系见图-2。 3.5方法精密度测定（表-2） 5.6方法的添加回收率测定（表-3）与气相比较（表-4） 四、探讨与结论 采用HPLC法分析样品中的2甲4氯钠盐的含量，方法的添加回收率、精密度、线性范围、分离效果均能满足质量分析要求。由于目前采用气相色谱衍生化法测定2甲4氯钠盐的含量，需采用重氮甲烷对样品进行衍生化处理，衍生化试剂重氮甲烷的制备进程比较繁琐、且易爆，具有一定的批次样品采用HPLC和GC分别测定比较，两种方法的测定结果较为吻合，数据具有可比性，因此HPLC法可以作为2甲4氯钠盐产品的质量检测方法使用。 样