NY_T 2071-2011饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的测定液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 65.120B 46NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2071—2011饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的测定液相色谱一串联质谱法Determination of aflatoxins ,zearalenone and T-2 in feeds-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry2011-09-01 发布2011-12-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 2071—2011前 言本标准遵照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)归口。本标准起草单位：浙江省饲料监察所、浙江大学饲料研究所。本标准主要起草人：朱聪英、应永飞、韦敏珏、陈慧华、陆春波、陈勇、罗成江、屈健、占秀安、余东游。I NY/T 2071—2011饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的测定液相色谱一串联质谱法1范围本标准规定了饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素含量的液相色谱一串联质谱测定方法。本标准适用于单一饲料、配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料中黄曲霉毒素B、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素 G1、黄曲霉毒素 G2、玉米赤霉烯酮和 T-2毒素含量的测定。本标准各黄曲霉毒素与T-2毒素的检测限为1.0ug/kg,定量限为2.0μg/kg;玉米赤霉烯酮的检测限为5.0μg/kg，定量限为10.0μg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样中的黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素经乙睛溶液提取，正已烷脱脂及霉菌毒素多功能净化柱净化后，氮气吹干，甲酸乙睛溶液溶解，液相色谱一串联质谱法测定。采用色谱保留时间和质谱碎片及其离子丰度比定性，外标法定量。4试剂和材料除特殊注明外，本法所用试剂均为分析纯，水符合GB/T6682中一级水的规定。4.1 乙腈。4.2乙睛：色谱纯。4.3甲醇：色谱纯。4.4正已烷。4.5甲酸：色谱纯。4.6冰乙酸。4.7提取液：准确量取乙睛（4.1）840mL和水160mL，摇匀，即得。4.83甲酸溶液(0.1%）：准确量取甲酸（4.5)1mL加水至1000mL，摇匀，即得。4.9乙酸溶液(0.02%）：准确量取冰乙酸（4.6)0.2mL加水至1000mL摇匀，即得。4.10甲酸乙腈溶液：取甲酸溶液（4.8)50mL加乙腈（4.2)至100mL，摇匀，即得。4.11黄曲霉毒素 B1、黄曲霉毒素 Bz、黄曲霉毒素 GI、黄曲霉毒素 G2、玉米赤霉烯酮和 T-2毒素标准品：纯度≥97.0%。4.12标准储备液：分别精密称取6种霉菌毒素标准品（4.11)至棕色容量瓶中，用甲醇配成浓度各为1 NY/T 2071—2011100μg/mL的霉菌毒素标准储备液，置一20℃保存。警告：由于霉菌毒素毒性很强，试验人员应注意自我保护。操作时，应避免吸入、接触霉菌毒素标准溶液。配置溶液应在通风橱内进行，工作时应戴眼镜、穿工作服、戴医用乳胶手套。凡接触霉菌毒素的容器，需浸入1%次氯酸钠溶液，过夜后清洗。同时，为了降低接触霉菌毒素的机会，本标准鼓励直接购买并使用霉菌毒素的有证标准储备液。4.13混合标准储备液：分别吸取一定量的6种霉菌毒素标准储备液（4.12），置于棕色容量瓶中，用甲醇稀释成浓度为1.00ug/mL的混合标准储备液。保存于4℃冰箱中。4.14基质匹配标准系列工作溶液：分别吸取一定量的混合标准储备液（4.13），添加空白样品提取液，氮气吹干后，用流动相稀释成浓度为1.0ug/L～200.0μg/L的混合标准系列工作溶液，临用新配。4.15霉菌毒素多功能净化柱：Trilogy TC-M160柱*，或效果相当者。5仪器和设备5.1·液相色谱一串联质谱仪：配有电喷雾电离源。5.2离心机：最大转速8000r/min或以上。5.3固相萃取装置。5.4旋涡混合器。5.5分析天平：感量0.00001g。5.6天平：感量0.01g。5.7氮吹仪。5.8超声波清洗器。6测定步骤6.1采样和试样制备按GB/T14699.1抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取200g，按照GB/T20195的规定制备样品，粉碎后过0.45mm孔径的分析筛，混匀，装入磨口瓶中，备用。6.2试样提取与净化称取5g士0.02g试样于50mL离心管中，准确加人25mL提取液（4.7），涡旋混匀2min，置于超声波清洗器中超声提取20min，中间振荡2次