DB37_T 3856-2019饲料中黄曲霉毒素B1、呕吐毒素、伏马毒素B1和玉米赤霉烯酮的测定　高效液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 65. 120B 46DB37山長东省地方标准DB37/T3856—2019饲料中黄曲霉毒素B1、呕吐毒素、伏马毒素B,和玉米赤霉烯酮的测定高效液相色谱串联质谱法Determination of aflatoxin B1, deoxynivalenol, fumonisins B1 and zearalenone infeeds—High performance liquid chromatography - tandem mass spectrometry2019-12-31发布2020-01-31实施山东省市场监督管理局发布 DB37/T 3856—2019前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草，本标准由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会提出并归口本标准起草单位：青岛农业大学、德州学院、山东省农业科学院家禽研究所。本标准主要起草人：朱连勤、陈甫、高晨、朱风华、李福伟、邱慧玲、王倩文、孙京新。I DB37/T 3856—2019饲料中黄曲霉毒素B、呕吐毒素、伏马毒素B,和玉米赤霉烯酮的测定高效液相色谱一串联质谱法警示一—由于黄曲霉毒素B、呕吐毒素、伏马毒素B:和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素是毒性很强的有毒物质，应小心处理，分析操作过程应在通风橱内或指定区域内进行。分析过程中，操作者应采取相应的防护措施，应穿工作服、戴眼镜、口罩、医用乳胶手套，避免吸入、接般霉菌毒素溶液。分析结束后，凡接触过毒菌毒素的器血及霉菌毒素溶液应使用浓度为5%次氯酸钠溶液漫泡过夜后清洗。为了降低接触霉菌毒素的机会，本标准鼓励直接购买并使用霉菌毒素的有证标准储备液。1范围本标准规定了饲科中黄曲毒毒素B、呕吐毒素、伏马毒素B和玉米赤霉烯酮含量测定的高效液相色谱一串联质谱测定方法。本标准适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混料中黄曲霉毒素B、呕吐毒素、伏马毒素B和玉米赤霉烯酮含量的测定本方法中黄曲霉毒素Bi、呕吐毒素、伏马毒素B,和玉米赤霉烯酮的检出限为0.005μg/kg、10μg/kg- 10 μg/kg和0. 10 μg/kg-2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样中的黄曲霉毒素B、呕吐毒素、伏马毒素B,和玉米赤霉烯酮经乙睛溶液提取，再经滤纸和有机滤膜净化，采用高效液相色谱-串联质谱法测定，外标法定量。试剂或材料除非另有规定，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂，4.1水：符合GB/T6682中规定的一级用水。4.2乙睛：色谱纯。4.3甲醇：色谱纯。4.4甲酸：色谱纯。4.5醋酸铵：优级纯。1 DB37/T 3856—20194.6提取落液：准确量取乙840ml和水160mL，混匀，即得。4. 7甲酸溶液（0.4%）：准确量取甲酸4mL加水定容至1000mL，混匀，即得。4.8酷酸铵溶液（1%）：准确称取酷酸铵1.0000g加水定容至100mL，混匀，即得。4.9甲酸醋酸铵溶液：取甲酸溶液（4.7）50mL加醋酸铵溶液（4.8）50mL，混匀，即得。4. 10黄曲毒毒素B对照品：纯度≥98.0%。4. 11玉米赤毒烯酮对照品：纯度98.0%4. 12伏马毒素B:对照品：纯度≥98.0%。4. 13呕吐毒素对照品：纯度≥98.0%4. 14标准储备落液：分别精确称取4种霉菌毒素对照品至棕色容量瓶中，用提取落液（4.6）配成落度为1000μg/mL的霉菌毒素标准储备溶液，-20℃保存，有效期为6个月。或有证标准溶液。4. 15混合标准储备落液：分别精密量取4种霉菌毒素标准储备落液1叫，置于棕色容量瓶中，用提取溶液（4.6）定容至100mL，配置成浓度为10.0μg/mL的混合标准储备溶液，4℃保存。4. 16标准系列工作溶液：将混合标准储备溶液用乙稀释成0.01ng/nL、0.10ng/nL、1.0ng/mL、10.0ng/mL、100.0ng/mL、1000.0ng/mL的混合标准系列工作溶液，临用新配。4. 17针头式过滤器：有机型，孔径0.22μm。5仪器设备5.1高效液相色谱一串联质谱仪：配有电喷雾电离源。5.2旋涡混合器。5.3分析天平：感量为0.1mg-5.4气溶摇床。6样品按GB/T14699.1规定采集有代表性的试样，按照GB/T20195规定将试样粉碎，过0.42m分析筛混匀装入密闭容器中，备用。7试验步骤7. 1试样处理平行做两份试验。称取5.000g（精确到0.0002g）试样置于50ml具塞锥形瓶中，准确加入2