藻胆蛋白的分离纯化.ppt

R-藻红蛋白的分离纯化 细胞破碎提取 R-藻红蛋白的分离  传统分离纯化： 多先经过硫酸铵盐析粗提藻胆蛋白 再经过一系列的层析柱组合纯化藻胆蛋白 目前分离纯化： 一步层析法 、利凡诺法 、双水相萃取法等分离纯化技术 双水相萃取法的优点 在低温或室温下进行分离纯化，保持了生物物质的生物活性 分相时间短，由于表面张力小 ，所以搅拌过程需要输入的能量很小，萃取可在很短的时间（ 5 min ~1 5 min）内达到平衡； 易于连续化操作，并且可将萃取规模放大 对于目标藻胆蛋白不仅具有很高的提取率（9 0 %左右，最大可达 9 7 .4 %），而且还可获得较高的纯度，基本可达分析级（ 4 .0） 其设备投资费用少，操作简单，不存在有机溶剂残留问题 双水相萃取法 坛紫菜经细胞破碎后得到藻红蛋白粗提液 在粗提液中加PEG 和硫酸铵盐后混合均匀，静置直至体系平衡分离成单独的相（此时目标蛋白分配到上相（ PEG相），而细胞碎片、 核酸、 多糖和杂蛋白等分配到下相（富盐相），除去下相） 第二步萃取是在上相中加入组成相同的盐，形成新的双水相体系，使目标蛋白质转入富盐相，从而将蛋白质与 PEG 分离，以便目的产物的进一步加工处理以及 PEG的回收利用 R-藻红蛋白是一种从藻类中提取的天然安全无毒的色素蛋白质，是一种重要的生理活性物质，具有抗氧化，提高免疫力能力，抗肿瘤及抗炎症等作用 R-藻红蛋白在食品 、化妆品乃至医药诊断，生物工程上的开发和利用不断向广度和深度发展，尤其在光动力学治疗，新型荧光探针，防治癌症 、溃疡和血栓等疾病的保健品和药品方面的贡献尤为显著 最新研究还发现藻红蛋白在光学信息存储与处理，快速光电探测 、人工神经网络等方面也具有潜在的应用前景 R-藻红蛋白 R-藻红蛋白的提取方法主要有反复冻融法、液氮研磨法、细 胞溶胀法、低浓度 CaCl2提取法、SDS 溶液提取法、纤维素酶 提取法和超声波破碎法等 根据提取纯度大小来衡量 反复冻融法＞低浓度 CaCl2提取法＞超声波破碎法＞SDS 提取 法＞液氮研磨法＞细胞溶胀法＞纤维素酶提取法 R-藻红蛋白的分离纯化