苦瓜子蛋白分离纯化的研究.pdf

山西农业科学2009，37(5)：20—23 JournalofShanxiAgricukurdSciences 苦瓜子蛋白分离纯化的研究 雷万钧 (山西农业大学生命科学学院，山西太谷030801) 摘 要：把苦瓜子粉碎后用50mmolL／乙酸抽提、硫酸铵沉淀，经透析得到蛋白粗提液，然后用考玛斯亮蓝 G-250法测蛋白质含量为 16．517 g，g；SDS—PAGE分析表明，苦瓜种子含有 3种蛋白组分，相对分子质量分 别为29．5，22．0和9．6kDa，其中分子量为29．5kDa的含量最多，9．6kDa的含量次之，22．0kDa的含量最少。 再对粗提液过SephadexG一100凝胶柱进一步纯化得到4个主峰，吸光度分别为0．62，0．28，0．36，0．42；经 SDS—PAGE检测，得知第 1，2峰分子量均为29．5kDa。 关键词：苦瓜子；蛋白质；分离纯化 中图分类号：$642．5 文献标识码 ：A 文章编号：1002—2481(2009)05—0020—04 IsolationandPurificationoftheProteinfrom M omordica CharantiaL Seed LEIWan-jun (CollegeofLifeScience，ShanxiAgriculturalUniversity，Taigu030801，China) Abstract：Seedssufferthecrush，5Ommol／Laceticacidandextraction，ammonium sulfateprecipitation，htecurdeproteinby dialysisfluidandtllentestThomas—blueG一250WaSmeaSuredandhteresultsshowedtllathtecurdeproteincontentWaS 16．517 g ，SDs—PAGE naalysisshowedhtatbittergourd seedsconatininghtreeproteincomponents，htemolecularweightswere 29．5，22．0na d9．6kDa，whichmolecularweightof29．5kDaWaS htemost，9．6kDahtesecond，22kDahteleast．Tohtecrudeextract ofa SephadexG-100 gelcolumn furtherpurifiedbythefourmain peaks，absorbanceswere0．62，0．28，0．36na d0．42．The SDS—PAGEdetectionshowedthathtefirstandsecondpeakswereall29．5kDa． Keywords：MomordicacharantiaLseed；Protein；J．1ationandpurification 苦瓜 (MomordicacharantiaL)又名锦荔枝 、 同品种的苦瓜分析表明，每 100g鲜苦瓜中含蛋 赖葡萄，是葫芦科 (Cucurbitaceae)苦瓜属一年生 白质0～～0．9g，脂肪0．2—0-3g，碳水化合物2～ 草质藤木植物，原产于亚洲南部热带地区，南宋 3g，膳食纤维 0．7～1．6g，维生素A56～84mg， 时传人我国。苦瓜作为民间中药在我国已有近 维生素 c20 97mg，胡萝 卜素0．5—1．0mg，钙 500年的应用历史。历代临床应用于治疗肿瘤、 18—22mg，磷 19—35mg，铁0．6～0．7mg，钾256 痢疾、中暑等症。本《草纲 目》中记载：“苦瓜苦寒、 mg。此外，还含有苦瓜甙、5一羟基色胺 、多种游离 无毒、除邪热、解劳乏、清心明目、益气壮阳”。大 氨基酸和果胶等物质。