第四章基因的分离和克隆基因工程课件.pdf

第四章单克隆抗和基因工程抗体的制备.ppt 第一节杂交瘤技术的基本原理第三节基因工程抗体双特异性抗体细胞工程BsAb 将两种分泌不同特异性单抗的杂交瘤细胞进行再次融合，产生四源杂交瘤 (quadroma)。但二次杂交瘤细胞株分泌的是两套重链，轻链的随机组合物。BsAb在其中的比例可为10%～50%不等。多倍杂交瘤细胞的稳定性差，BsAb的产量少且活性低，费时费力，临床应用时存在人抗鼠抗体免疫反应 (HAMA)，因此不适用于临床。　第四节　单克隆抗体应用 ①从外周血或脾、淋巴结等组织中分离B淋巴细胞，提取mRNA并逆转录为cDNA； ②应用抗体轻链和重链引物，根据建库的需要通过PCR技术扩增不同的Ig基因片段；

2018-07-08 约4.3千字 81页立即下载

第四章单克隆抗基因工程抗体的制备.ppt 第一节杂交瘤技术的基本原理一、杂交瘤技术二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存第一节杂交瘤技术的基本原理第三节基因工程抗体制备将两种分泌不同特异性单抗的杂交瘤细胞进行再次融合，产生四源杂交瘤 (quadroma)。但二次杂交瘤细胞株分泌的是两套重链，轻链的随机组合物。BsAb在其中的比例可为10%～50%不等。多倍杂交瘤细胞的稳定性差，BsAb的产量少且活性低，费时费力，临床应用时存在人抗鼠抗体免疫反应 (HAMA)，因此不适用于临床。第四节单克隆抗体的应用从外周血或脾、淋巴结等组织中分离B淋巴细胞，提取mRNA并逆转录为cDNA；应用抗体轻链和重链

2019-04-08 约5.2千字 82页立即下载

第四章-基因工程.ppt 第四章基因工程原理——基因工程的基本工具Gene Engineering 定义基因工程：对生物体遗传信息的基本单元——基因进行人工改造、干预和定向转移，其技术特征是将不同种类生物的基因或同种生物体的不同基因按照人们的意愿在体外进行拼接重组和变异，通过载体-宿主系统转入另一种生物体内，使之能按照人们的意愿稳定遗传、复制和表达，实现按照人们的意愿，改造生物的遗传特性，创造出生物的新性状的目的。基因工程基础——核酸 /programs/view/vpwPwCuNtgU/ 基因工程药物的生产过程基因工程在生物工艺中的应用筛选和鉴定具有重要生理功能或重要用途的目的基因；筛选、修

2019-03-22 约2.28万字 143页立即下载

基因工程课件-第四章基因的转移与重组体的检验.pptx 外源DNA;1.转化（transformation);使用丧失了限制体系的大肠杆菌。如K12系列的大肠杆菌。;;;外源载体DNA（携带插入基因片断）进入感受态菌体细胞里的过程。;;电穿孔转化;LB培养受体菌至OD600=0.5-0.6;细菌原生质体的转化;转化的原理与技术;转化的原理与技术;转化的原理与技术;转化率;转化率;转化率;转化率;转化率;转化率;供受体的比例：;转化细胞的扩增;转化细胞的扩增;小结;二转化子的筛选和鉴定（检）;根据重组体克隆的表现型特征进行选择的方法。;pBR322质粒上有两个抗菌素抗性基因，Tetr和Ampr。 Tetr上有插入位点BamH I和Sal I; A

2023-05-06 约小于1千字 55页立即下载

.第四章-基因工程的操作过程.ppt 生物工程专业核心课程基因工程的基本概念 A DNA的体外重组（切与接） B 重组DNA分子的转化和扩增（转与增） C 转化子的筛选和鉴定（检） C 转化子的筛选和鉴定（检）转化细胞的扩增扩增操作的目的增殖转化细胞，使得有足够数量的转化细胞用于筛选程序扩增和表达载体分子上的标记基因，便于筛选表达外源基因，便于筛选和鉴定 4 基因工程的操作过程载体遗传标记检测克隆DNA序列检测外源基因产物检测 4 基因工程的操作过程由于重组率和转化率不可能达到理想极限，因此必须借助各种筛选和鉴定方法区分转化子与非转化子、重组子与非重组子、目的重组子与非目的

2017-10-03 约字 66页立即下载

第四章基因工程..Convertor精选.doc 第四章基因工程基因工程(gene engineering)：又称为重组DNA技术，是指将外源基因通过体外重组后导入受体细胞，并使其能在受体细胞内复制和表达的技术。分子克隆(molecular cloning)：是指在体外将制备的DNA片段与载体重组，然后导入受体细胞，并在受体细胞中复制、扩增，以获得该DNA分子的大量拷贝的技术。第一节工具酶(限制性核酸酶内切酶；DNA聚合酶；DNA连接酶；碱性磷酸酶；核酸酶S1) 一、限制性核酸内切酶(restriction endonuclease, RE) 限制性核酸内切酶(RE)是一类能识别和切割双链DNA特定核苷酸序列的核酸水解酶。限制

2017-03-27 约9.37千字 8页立即下载

基因工程第四章-工具酶幻灯片.ppt Chapter Four Manipulative Enzymes 核酸酶：指通过切割相邻的两个核苷酸之间的3－5磷酸二酯键，而引发核酸分子发生水解断裂的酶。按水解断裂核酸分子的方式不同，分为核酸内切酶和外切酶。核酸外切酶：从核酸分子的末端开始，一个核苷酸，一个核苷酸地消化降解多核苷酸的酶。核酸内切酶：从核酸分子的内部，切割磷酸二酯键使之断裂并形成小分子片断的酶。限制性内切酶是核酸内切酶的一种。一、限制性内切酶的发现与种类： 1、限制性内切酶的发现： 20世纪60年代在研究细菌的限制和修饰现象时被Linn和Arber发现，他们研究的是大肠杆菌。大肠杆菌细胞可以降解噬菌体的DN

2018-06-15 约4.61千字 34页立即下载

第四章基因工程..Convertor要点.doc 第四章基因工程基因工程(gene engineering)：又称为重组DNA技术，是指将外源基因通过体外重组后导入受体细胞，并使其能在受体细胞内复制和表达的技术。分子克隆(molecular cloning)：是指在体外将制备的DNA片段与载体重组，然后导入受体细胞，并在受体细胞中复制、扩增，以获得该DNA分子的大量拷贝的技术。第一节工具酶(限制性核酸酶内切酶；DNA聚合酶；DNA连接酶；碱性磷酸酶；核酸酶S1) 一、限制性核酸内切酶(restriction endonuclease, RE) 限制性核酸内切酶(RE)是一类能识别和切割双链DNA特定核苷酸序列的核酸水解酶。限制

2017-01-21 约9.37千字 8页立即下载

第四章克隆基因的表达ppt课件.ppt 四、昆虫细胞表达系统 1.杆状病毒（Baculouirus）广泛侵染包括昆虫在内的无脊椎动物。（1）侵染周期：两种形式 ①单独病毒粒子形式 ②多面体形式一般使用苜蓿银纹夜蛾细胞核型多角体病毒（2）杆状病毒的表达特点感染后36-48h，病毒开始合成大量的多角体蛋白多角体蛋白的启动子特别强多角体蛋白基因可以被替换掉而不影响病毒的繁殖转化子筛选多角体基因被外源基因取代后，病毒仍然能形成有感染能力的病毒粒子，但不能形成多面体。通过显微镜检查看是否有多面体形成。 2.杆状病毒转化载体杆状病毒的基因组太大（13kb环状DNA），不能直接插入。必须用同源重组的办法（

2017-05-25 约1.78万字 160页立即下载

第四章基因工程的操作过程课件.pptx 第四章基因工程的操作过程 1 基因工程的基本概念 2 基因工程的基本原理 3 基因工程所需的基本条件 4 基因工程的操作过程 5 目的基因的克隆与基因文库的构建 6 大肠杆菌基因工程 7 酵母基因工程 8 哺乳动物基因工程 9 高等植物基因工程基因工程 A DNA的体外重组(切、接) B 重组DNA分子的转化和扩增(转、增) C 转化子的筛选和鉴定(检) 4 基因工程的操作过程 4 基因工程的操作过程切接转检增同种内切酶生产的粘性末端的连接同尾酶生产的粘性末端的连接

2023-10-17 约1.11万字 10页立即下载

第四章基因克隆的载体讲课.ppt 2）端粒(telomere sequences, TEL) 定位于染色体末端一段序列，用于保护线状的 DNA不被胞内的核酸酶降解，以形成稳定的结构。 3）自主复制序列（ autonomous replicating sequence ,ARS）一段特殊的序列，含有酵母菌中 DNA 进行双向复制所必须的信号，是染色体自主复制的复制起点。 4）YAC 载体的选择标记主要采用营养缺陷型基因，如色氨酸、亮氨酸和组氨酸合成缺陷型基因 trp1、 leu2和 his3、尿嘧啶合成缺陷型基因 ura3 等，以及赭石突变抑制基因 sup4 。

2017-05-06 约9.37千字 78页立即下载

分离工程第四章1.ppt 第四章 萃取通过本章学习应掌握以下内容：萃取的概念液－液萃取从机理上分析可分为哪两类？何谓物理萃取和化学萃取？何谓萃取的分配系数？其影响因素有哪些？了解单级萃取的计算方法。了解多级萃取的计算方法。何谓超临界流体萃取？其特点有哪些？何谓双水相萃取?常见的双水相构成体系有哪些？反胶团的构成以及反胶团萃取的基本原理。萃取是生物分离中常用的单元操作萃取原理：利用溶质在互不相溶两相间分配系数的不同使溶质得到纯化或浓缩的方法。单级萃取使含溶质的溶液（h）和萃取剂（L）解出混合，静止后分成两层。萃取技术的发展

2016-05-15 约7.43千字 97页立即下载

四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备.ppt 第一节杂交瘤技术的基本原理一、杂交瘤技术二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存第一节杂交瘤技术的基本原理第三节基因工程抗体制备将两种分泌不同特异性单抗的杂交瘤细胞进行再次融合，产生四源杂交瘤 (quadroma)。但二次杂交瘤细胞株分泌的是两套重链，轻链的随机组合物。BsAb在其中的比例可为10%～50%不等。多倍杂交瘤细胞的稳定性差，BsAb的产量少且活性低，费时费力，临床应用时存在人抗鼠抗体免疫反应 (HAMA)，因此不适用于临床。第四节单克隆抗体的应用从外周血或脾、淋巴结等组织中分离B淋巴细胞，提取mRNA并逆转录为cDNA；应用抗体轻链和重链

2017-03-24 约5.2千字 82页立即下载

生物技术与工程《第四章基因工程》大单元整体教学设计.docx 生物技术与工程《第四章基因工程》大单元整体教学设计一、内容分析与整合（一）教学内容分析《第四章基因工程》是高中生物学选择性必修3《生物技术与工程》中的重要章节，它涵盖了基因工程的基本原理、操作流程、应用领域以及相关的伦理与安全问题。本章内容旨在让学生深入了解基因工程这一现代生物技术的核心，理解其如何赋予生物新的遗传特性，并探讨基因工程技术在农业、医药、环境保护等多个领域的广泛应用及其对社会的影响。基因工程是一门涉及多个学科交叉的综合性技术，它基于分子生物学、遗传学、生物化学等学科的理论基础，通过体外操作DNA分子，实现基因的剪切、连接、复制和表达，从而创造出具有特定遗传性状的新生物类

2025-02-04 约1.75万字 31页立即下载

第四章基因工程的基本技术DNA序列分析.解读.ppt Chapter Four基因工程的基础知识与基本技术第三节 DNA序列分析 Sanger双脱氧链终止法 Maxam-Gilbert化学裂解法测序的常用方法 Sanger双脱氧链终止法(chain-terminator method) 1977年Sanger充分利用DNA复制的生物学特性, 设计了一种通过DNA复制来识别4种碱基的方法, 进行DNA序列测定,即双脱氧链终止法因Sanger法测定了碱基序列, 获得1980年诺贝尔化学奖 (注：1958年因用酶法测得人胰岛素的氨基酸排序而得诺奖) 1.Sanger双脱氧链终止法原理基本原理：聚丙烯酰胺凝胶电泳可

2016-11-02 约4.3千字 30页立即下载

第四章 基因的分离和克隆 基因工程课件.pdf

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