乙型丙型肝炎的实验室诊断ppt课件.ppt
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乙型肝炎与丙型肝炎实验室诊断;乙型肝炎病毒感染的检测
血清学检测
病毒核酸检测
病毒的血清学与基因分型
病毒基因变异的检测;乙肝病毒的电镜形态;乙肝病毒颗粒结构示意图;;乙肝病毒遗传结构;HBV感染相关血清标志;HBsAg共同抗原决定簇的变异;294例单纯抗-HBc阳性者抗体滴度 与HBV DNA检出率;慢性感染;HBV DNA 测定的敏感性;;HBV基因型与血清型的对应关系和流行病学;难治性乙型肝炎;HBV基因变异;拉米夫定抵抗突变;HBV基因变异的测定方法;筛选与诊断实验的方法:
血清学检测(抗-HCV)
病毒核酸定性检测
病毒核酸定量检测
病毒抗原的检测
病毒的基因分型
病毒核酸的血清学分型;CDC MMWR 2003; 52(RR-1):1-44.;抗-HCV检测中HCV的抗原;实验室检测抗-HCV程序;病毒 抗体试验 NAT/PCR 缩短
HCV 抗-HCV 82 天 23 天 72 %
HBV HBsAG 59 天 34 天 41 %
HIV 抗-HIV-1 22 天 11 天 50 %;方法:
RT-PCR(市售或室内)
Branched-DNA
应用:
确定病毒滴度
抗病毒疗效监测和预测
评价:
灵敏度低于定性检测(600 IU/ml)
不用于HCV感染的最初检测
不能用于排除诊断和确定治疗终点
标本采集要求:
2~4Hr分离血清,-20℃ ~ -70℃保存,干冰运输 ;HCV国际单位与拷贝数换算;方法:
酶免疫技术(ELISA,双抗体夹心法)
游离抗原、总抗原
应用:
献血员筛查
确定现症感染
抗病毒疗效监测
评价:
易于操作,便于推广,实验条件要求较低,不存在污染问题
与抗-HCV联合筛查献血员,显著降低输血后HCV感染
HCVRNA低于10,000-20,000 IU/ml时,不宜应用
;
HCV Ag在外周血中的测定可以大大缩短HCV感 染后检测的窗口期、提高检测的灵敏度。
HCV Ag用于献血员筛查则可以进一步检出窗口 期污染血样,从而降低输血后HCV感染的残余风险度、保证安全输血。
HCV Ag也可作为衡量样品中病毒载量的标志物之一、与HCV-RNA的定量测定一同用于抗病毒治疗过程中的疗效观察和监测。;;HCV 感染标志;
;方法:
PCR
序列分析
分子杂交
应用:
确定治疗方案
预测疗效
评价:
血清学分型不能鉴别亚型
血清学分型可能常见到混合感染
标本采集要求:
2基因分型标本需要特殊要求;难治性慢性丙型肝炎
(Difficult-to-treat Chronic Hepatitis C);HCV 基因分型的分子进化分析;Consensus Cha/ Chan/ Enomoto Mori/ Tsukyama/
scheme Urdea Simmonds Okamoto Kohara
1a I 1a K-PT I nc
1b II 1b K-1 II I
1c nc nc nc nc nc
2a III 2a K-2a III II
2b III 2b K-2b IV II
2c III nc
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