第八章 基因重组和基因工程.pdf

第八章 第八章 基因重组和 因工程 基因重组和 因工程 Genetic Recombination and Genetic Engineering Genetic Recombination and Genetic Engineering 第一节 自然界DNA重组和基因转移 是经常发生的 DNA Recombination and Gene Transfer Occur Frequently in Nature DNA重组 DNA重组 同源重组(homologous recombination) 接合作用(conjugation) 转化作用(transformation) 转导作用(transduction) 位点特异的重组(site-specific recombination) 转座(transposition) 一、同源重组是最基本的DNA重组方式 发生在同源序列间的重组称为同源重组 (homologous recombination) ，又称基本 组（general recombination ）。是最基本的 DNA重组方式，通过链的断裂和再连接， 在两个DNA分子同源序列间进行单链或双 链片段的交换。 以E.coli 的同源 组为例，了解同源 组机 制的Holliday模型。 n Holliday模型的4个关键步骤： n Holliday模型的4个关键步骤： 两个同源染色体DNA排列整齐； 两个同源染色体DNA排列整齐； 一个DNA的一条链断裂、并与另一个DNA 一个DNA的一条链断裂、并与另一个DNA 对应的链连接，形成Holliday中间体； 对应的链连接，形成Holliday中间体； 通过分支移动产生异源双链DNA ； 通过分支移动产生异源双链DNA ； Holliday中间体切开并修复，形成两个双链 Holliday中间体切开并修复，形成两个双链 重组体DNA，分别为： 重组体DNA，分别为： 片段 组体(patch recombinant) 拼接 组体(splice recombinant) 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 5´ 内切酶 3´ 5´ 5´ 3´ 3´ 5´ 3´ 5´ 5´ 3 ´(recBCD) 5´ 3´ DNA侵扰 (recA) 5´ 3´ 5´ 3´ 3´ 5´ 分支迁移 3´ 5´ 3´ 5´ (recA) 3´ 5´ 5´ 3´