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ERIC-PCR技术特点及其应用.pdf

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维普资讯 安徽农业科学。JoumalofAnh Agn.Sci.2007。35(18):5358—5360 责任编辑 孙红忠 责任校对 李洪 ERIC.PCR技术特点及其应用 李犹平,倪学勤 (四川农业大学动物科技学院,四川雅安625o14) 摘要 ERIC序列是近年来发现的存在于原核生物基 因组 中一类短的重复序列。该序列在染色体上的分布和拷贝数具有种间的特异 性,根据序列中心高度保守的44bp的ERIC核心序列设计反向引物,可扩增 出反映细菌基因组结构特征的谱带。由于ERIC—PCR快速简 便,图谱重复性好,能用于细菌分类鉴定、环境监测、污染治理以及人和动物肠道茵群结构研究等方面。 关键词 ERIC;IRU;ERIC—PCR;特点;应用 *llil~类号 Q503 文献标识码 A 文章编号 0517—66ll(2O )l8—05358—03 CharacteristicandAt~iieationoftlleEnterobacterialRepetitiveIntergenicConsenstl~PCR LIyou-pnigetal (CollegeofAnimalScienceandTechnology,SichuanAgriculturalUniversity,Yaan,Sichuan625014) Abstract EnterobacterialRepetitiveIntergenicConsensus(ERIC),akindofshoflduplicationsequences,isfoundtoexistinthegenomeofprokaryoticor- g~ism.DistributionandcoW ofhtesequenceinchromosomeisniterspecificspecificiyt.Accordingtohtehighlyconservativecoresequence,44bp,reverse primeriSdesigned.ERIC.PcRcangenerateuniquefmgerprintstoreflcethtestructuralfeatureofbacterials位Iirls.andCallidentificationspecies.ERIC— PCR techniquecanbeusednihteidentifiactionofbacterium,environmentalmonitoring,investigationnitestinalfloraofhumanbeingsnadnaimals,whichiS rapid,simpleandrepetitive. ’ Keywords ERIC;Ⅱ{ ;ERIC—PCR;Characteristic;Appliaction 传统的微生物分类鉴定方法是基于微生物的表型特征, ERIC的功能 目前还不太清楚,只是根据它的结构作了 如生长、营养、生理生化等,只能检测可培养的细菌,且费时、 一 些猜测。认为位于基因3末端的ERIC可能由于形成二级 费力,易受操作方法影响。近年来随着分子生物学技术的发 结构后,其茎环结构防止外切核酸酶对基因3末端的降解, 展 ,如PFGE、RFLP、ARDRA、RAPD-PCR、DGGE-PCR、ERIC.PCR 促进上游基因的表达;ERIC在基因组间的位置和拷贝数具 等越来越多地应用于微生物种群结构特征 ,系统多样性和动 有种属特异性,可能该序列本身就为DNA提供某些结构或 力学变化等方面的研究。这些技术克服了传统方法的局限 功能相关的信息,这些信息被核酸代谢相关的特定蛋白识 性,在微生物的分类鉴定中发挥越来越大的作用。ERIC.PcR 别,从而影响核酸的代谢,或者提供位点用于在类核中组织 技术是利用ERIC序列中的高度保守区来设计的一对反向引物 染色体;大多数ERIC是可以转录的,在mRNA中的茎环结构 进行PCR扩增 ,因此通过该技术扩增基因组DNA,构建 DNA指 可能干扰核糖体与
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