铁皮石斛种苗不同部位抗氧化酶活性的差异.doc

铁皮石斛种苗不同部位抗氧化酶活性的差异 　　摘要：分析铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）种苗根、茎、叶抗氧化酶SOD、POD、CAT的活性变化。结果表明，铁皮石斛种苗的根、茎、叶SOD酶活性大小顺序依次是茎根叶，POD活性大小顺序依次是根茎叶；而CAT活性大小顺序依次是叶根茎；不同部位的不同抗氧化酶的活性变化不同。推断根和茎生长过程中起抗氧化作用的关键酶是SOD与POD，而叶的生长过程中起抗氧化作用的关键酶是CAT。 　　关键词：铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）；部位；抗氧化酶 　　中图分类号：Q945.78；S567.5 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）19-5081-02 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.19.047 　　Abstract： The antioxidant enzymes SOD，POD，CAT activity of roots，stems，leaves parts of Dendrobium officinale Kimura et Migo seedlings were analysed. The results showed that the size of SOD activity of Dendrobium officinale Kimura et Migo seedlings root，stem and leaf parts followed by stemrootleaf，POD activity size followed by rootstemleaf，and CAT activity size followed by leafrootstem. Antioxidant activity of different enzymes in different parts were different. The key enzyme in root and stem growth process played antioxidant may be SOD and POD，but the leaves of the growth process in the antioxidant enzymes may be CAT. 　　Key words：Dendrobium officinale Kimura et Migo；different parts；antioxidant enzyme 　　植物在生长代谢过程中产生的活性氧（ROS）对植物自身有着潜在的毒性，而其抗氧化酶系统可有效清除活性氧，增强植物的抗逆性，提高植物自身对外界的适应能力，有利于植物的生长[1]。兰科石斛属植物铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）位居“九大仙草”之首，可用于治疗热病伤津、口干烦渴等多种病症[2-4]。现代药理学研究结果显示，铁皮石斛有抗氧化、提高免疫力、抗肿瘤、降血糖等多种作用，由于野生品种的不断减少，组培、栽培技术的研究逐渐得到重视[5，6]。鉴于抗氧化酶系统具有重要意义，本试验对铁皮石斛种苗生长过程中不同部位的抗氧化酶活性进行测定，以期为铁皮石斛的组培及高产栽培技术的研究提供必要参考。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　采用栽培了8个月的铁皮石斛种苗，选自江西中医药大学药学院组织培养实验室，经江西中医药大学张寿文教授鉴定为兰科植物铁皮石斛。 　　1.2 方法 　　取同一育苗盆中的铁皮石斛种苗6份，将其根、茎、叶分开，比较铁皮石斛不同部位抗氧化酶活性。再分别取不同组别的叶片（植株从顶端往下第3、4片叶子）进行抗氧化酶活性测定。 　　酶液制备：取材料1 g，加入4 mL预冷的磷酸缓冲液（PBS，0.07 mol/L KH2PO4与0.07 mol/L Na2HPO4?15H2O按3∶7的比例混合，pH 7.2）提取，冰浴条件下研磨成匀浆，4 ℃条件下，10 000 r/min离心10 min，所得上清液即可用于超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性测定。 　　1）超氧化物歧化酶（SOD）活性测定：采用SOD抑制氮蓝四唑（NBT）在光照条件下的还原作用来测定SOD活性[7]。 　　2）过氧化氢酶（CAT）活性测定：参照李仕飞等[8]的方法，并略做改动，通过直接测定H202的减少量来表示过氧化氢酶的活性。 　　3）过氧化物酶（POD）活性测定：参照王伟玲等[9]的方法，并略有改动，根据过氧化物酶氧化愈创木酚的生成物的