双缩脲法测定血清蛋白质含量.doc

重庆医科大学基础医学院教案用纸（首页） 第 次数 授课时间 教案完成时间 学 科 生物化学实验 年 级 专业、层次 教 师 职 称 授课方式（大、班） 学时 课程（章、节） 双缩脲法测定血清蛋白质含量 基本教材或主要参考书 科学出版社《生物化学与分子生物学实验》（1） 教学目的与要求： 掌握双缩脲法测定蛋白质的原理。 学习掌握分光光度计的使用。 教学重点、难点： 双缩脲法测定蛋白质的原理及方法学评价。 分光光度计的使用及注意事项。 标准曲线的制作。 大体进程及教学方法： 以蛋白质定量分析技术的必要性、蛋白质定量测定不同方法的介绍为切入点，采用多媒体教学，主要介绍双缩脲法测定蛋白质的原理及方法学评价、分光光度法的原理及分光光度计的使用、实验操作过程及注意事项。以讲授、示教、学生操作为主。 实施情况： 重庆医科大学基础医学院教案用纸（续页） 基本内容 辅助手段和时间分配 【实验目的】 1．掌握双缩脲法测定蛋白质的原理。 2．学习掌握分光光度计的使用。 【 1．双缩脲法测定蛋白质的原理及方法学评价 2．分光光度法的原理及分光光度计的使用 【】 1．试管编号按表操作0分钟后比色，读取各管光吸收值并记录。 2． 3．查出该待测血清样本的蛋白质浓度（gL） 4．标准管法计算蛋白质浓度并与标准曲线法结果比较。 【】 2．各管加好样后必须充分混匀。显色反应需要20 min ~30 min才能完成，显色后放置4小时光吸收值稳定。 【思考题】 1．用双缩脲法和分光光度法的基本原理解释为什么双缩脲法可以定量测定蛋白质的含量。 2．为什么标准曲线法与计算法测定的蛋白质数值有差异？分析两种方法产生差异的可能原因。 3．本实验应于加双缩脲试剂多少时间才能进行比色测定？并应在显色多少时间内完成比色读数，为什么？ 采用多媒体辅助教学。 教师讲授和示教30min，其余时间安排学生操作和分析讨论。