关于制何首乌提取技术研究.doc

关于制何首乌提取技术研究【中图分类号】R94 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2011）02-0177-01 【摘要】目的：以制首乌中二苯乙烯苷的含量为考察指标，优选出最佳且适合大生产的工艺条件。方法：采用高效液相色谱(HPLC)法检测样品中的二苯乙烯苷含量，对提取、浓缩及干燥工艺条件进行比较，使二苯乙烯苷尽可能少地被破坏。结果：采用70%的乙醇回流提取3次，第1次10倍量提取2 h，第2次8倍量提取2 h，第3次8倍量提取1 h，在碱性条件真空浓缩后喷雾干燥即可。结论：该工艺科学、可行、稳定，适合大生产。 【关键词】制首乌；提取；工艺 制何首乌具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨之功效，制首乌颗粒具有增强免疫功能、抗氧化作用、延缓大脑衰老、提高 DNA修复功能、延长寿命、能促进肠蠕动、抑制甘油三酰(TG)及胆固醇在肠道中的吸收 ,从而降低血脂，降低胆固醇 ,改善脂肪代谢等多项功能，其有效成分为二苯乙烯苷类化合物??[1]?。临床用于血虚萎黄，眩晕耳鸣，须发早白，腰膝酸软，肢体麻木，崩漏带下，高血脂等。本实验主要对制首乌的提取、浓缩及干燥工艺进行了筛选。现报道如下。? 1 仪器与试药 Agilent 1100 型高效液相色谱仪。制何首乌药材，购于河北安国市场，经鉴定为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根炮制加工品??[2]?;流动相所用甲醇为色谱纯试剂,水为重蒸水,其他试剂均为分析纯;二苯乙烯苷对照品：购自中国药品生物制品检定所(批号：110844-200404)。? 2 方法与结果 2.1 二苯乙烯苷含量测定方法：色谱条件与系统适用性试验色谱柱：C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-水(22∶78);柱温30℃，流速1.0 ml/min;检测器为紫外检测器;检测波长320 nm。 对照品溶液的制备精密称二苯乙烯苷对照品15.20 mg，置50 ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.304 mg/ml的二苯乙烯苷对照品溶液。 供试品溶液的制备取制成的提取样品干膏细粉0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 ml，密塞，称定重量，加热回流30 min，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，上清液用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.2 提取正交实验结果 （1）正交实验因素水平的设计选取对提取影响较大的4个因素进行考察：提取次数(A)，提取时间(B)，加醇量(C)，醇的浓度(D)，以二苯乙烯苷的量为指标进行正交实验。 水提取因素水平 水平A提取次数B提取时间t/hC加醇量/倍D醇的浓度(%)111660221.58703321080 （2）实验方法：先将制何首乌饮片粉碎取10目与50目之间颗粒，共取9份颗粒各20 g,按正交设计进行实验，合并提取液浓缩加水定容为500 ml，对其检测，计算。平行进行两次正交实验。 （3）实验结果：由直观分析可知：以总二苯乙烯苷为考察指标时，4个因素的影响大小顺序为：提取次数醇的浓度提取时间加醇量。最佳工艺为A3B2C3D2，即用70%乙醇提取3次，2 h/次，每次加10倍量的乙醇提取。 （4）方差分析：将试验数据进行方差分析，对各因素影响大小的显著性进行了F值检验。结果见表3。 分析表明，提取次数、提取时间、加醇量、醇浓度都是重要因素，为缩短生产周期，节约成本，但又不影响二苯乙烯苷的提取，故优选的提取工艺条件定为：A3B(2.2.1)C(3，2，2)D2，即第1次提取2 h，加10倍量70%乙醇，第2次提取2 h，加8倍量70%乙醇，第3次提取1 h，加8倍量70%乙醇。其验证实验结果表明最佳工艺与选定工艺试验结果差别不大，表明优选工艺稳定可行。 2.3 浓缩工艺与结果取制何首乌适量，按确定的工艺进行提取; 分别取醇提水沉液20 kg共4份，其中两份pH值为6.0，在常压下浓缩(50～60℃);另外两份的其中一份调pH值为8.5，采用减压(真空-0.08MPa，50～60℃)浓缩。在浓缩至相对密度约为1.10，1.20和1.30左右时，取样检测总二苯乙烯苷含量，结果得出最佳浓缩条件为碱性条件下减压浓缩。 2.4 干燥工艺与结果取制何首乌适量，按确定的工艺进行提取和浓缩;取稠膏40kg平均分成4份，一份放入60℃恒温循环烘干箱中常压干燥，一份放入60℃真空干燥箱中(压力0.65大气压)干燥成干膏，一份采用喷雾干燥(进风温度为145℃)制成喷雾粉，一份采用微波干燥