放射免疫检测技术.ppt

二者的异同点如下： ①标记物 RIA 以放射性核素标记抗原；IRMA 则是标记抗体。 ②反应速率 IRMA 反应速度比RIA 快。 ③反应原理 RIA 为竞争抑制性结合，反应参数与待检抗原量成反相关；IRMA为非竞争结合，反应参数与待检抗原成正相关。 ④特异性 IRMA 特异性较RIA高。 ⑤灵敏度和检测范围 IRMA测定的灵敏度明显高于RIA， IRMA标准曲线工作范围较RIA宽1~2个数量级。 ⑥其他 RIA 所用抗体为多克隆抗体，对亲和力和特异性要求较高，但用量很少；IRMA 为试剂过量的反应，对抗体亲和力的要求不及 RIA，但用量大。此外，RIA 可以测量半抗原，但IRMA只能测定至少有两个以上表位的抗原。 四、RIA与IRMA的比较 五、放射免疫分析中造成测量误差的因素 误差包括系统误差和随机误差。系统误差发生在测量过程中由于仪器不准、试剂不纯、标准品不稳定等原因，使测定结果呈倾向性偏大或偏小，这种误差应力求避免。随机误差是测量过程中各种偶然因素造成的，没有固定的倾向性，这类误差是不可避免的，必要时做统计学处理。 　造成误差的可能来源有以下几个方面： 　　1．各种仪器：设备的准确性、稳定性、效率以及被污染等情况带来的误差。如：①由于放射性测量仪器的稳定性、效率、样品试管的材料和均匀性及被测物的放射性强度等原因。②由于样品的自吸收，本底校正，测定时间，可能的污染等原因。③在试验室中所有的移液管、微量取样器以及天平的刻度、校准和使用方法等原因。④由于反应试管、移液管以及测定用试管等表面清洁度和所引起的不同吸附等原因都可以对测定结果带来误差。 　　2．试剂的纯度、质量和稳定性的影响也是造成误差的重要因素。如标记抗原的比度、纯度，辐射自分解，抗体的稳定性，分离剂、阻断剂及缓冲液等试剂的纯度等。 3．在放射免疫分析中一些基本操作，如取样、提取、沉淀、分离以及保温条件不适当等造成的误差。由于工作人员熟练程度不同也常常带来误差，如操作移液管垂直程度、下流速度、吹气与不吹气等。工作人员草率、不按规程操作等也都可以造成误差。 4．样品误差。样品的收集方法、贮存温度、放置条件，微量样品取样的准确度，样品可能造成的污染以及样品的变性（如免疫反应活性的降低、蛋白质的变性等）也都能造成测量的误差。 5．提取及层析分离过程中的丢失。 五、放射免疫分析中造成测量误差的因素 六、核废物的处理 放射性废物中的放射性物质，采用一般的物理、化学及生物学的方法都不能将其消灭或破坏，只有通过放射性核素的自身衰变才能使放射性衰减到一定的水平。而许多放射性元素的半衰期十分长，并且衰变的产物又是新的放射性元素，所以放射性废物与其它废物相比在处理和处置上有许多不同之处。 1、放射性废水的处理 　 放射性废水的处理方法主要有稀释排放法、放置衰变法、混凝沉降法、离子变换法、蒸发法、沥青固化法、水泥固化法、塑料固化法以及玻璃固化法等。 　 2、放射性废气的处理 　　 (1)铀矿开采过程中所产生废气、粉尘，一般可通过改善操作条件和通风系统得到解决。 　　 (2)实验室废气，通常是进行预过滤，然后通过高效过滤后再排出。 　　 (3)燃料后处理过程的废气，大部分是放射性碘和一些惰性气体。 　　 3、放射性固体废物的处理和处置 　　 放射性固体废物主要是被放射性物质污染而不能再用的各种物体 　　 (1)焚烧 (2)压缩 (3)去污 (4)包装 六、核废物的处理 七、在医学检验中应用 1.激素的测定 RIA可用于大多数激素的测定，对相关疾病的诊断和治疗提供重要的实验依据。如： ①蛋白质及肽类激素 胰岛素、胰泌素、胃泌素、生长激素、ACTH、TSH、HCG等； ②非肽类激素 T3、T4、孕酮、雌二醇、雌三醇、醛固酮、地塞米松、前列腺素等。 2、药理学方面　 在药理学和临床药学方面，RIA可用于药物的吸收、分布和代谢研究，检测违禁药物、药物中毒等。常涉及药物有地高辛、吗啡、巴比妥类、核酸衍生物(cAMP、cGMP等)和一些常用的抗生素。 3、其它 用于检测乙肝系列抗原和抗体、Ig亚型分析等；检测肿瘤特性等。 七、在医学检验中应用 八、课堂小结 九、作业 答案： 放射免疫技术由于其测定的灵敏度高，特异性强，精密度好，而且可对半抗原和抗原测定以及测定仪器设备条件要求不高，因此广泛用于生物医学检验。常用于各种激素、微量半抗原、肿瘤标志物、药物等微量物质的测定。 由于大多数检验项目均有 RIA 或 IRMA 试