DNA的鉴.ppt

实验九 DNA的粗提取与鉴定;复习目标 1．了解与实验相关的三个实验原理． 2．会对 ． 3．掌握 ． 本实验考查; 1．实验原理 利用DNA在 ，中溶解度最低，而 的特点，可以 ，形成沉淀析出，通过过滤，得到 ．再利用 利用 的特性，可以鉴定提取的DNA． 2．实验目的 (1)了解生物组织中 ． (2)初步掌握 的方法． (3)观察 物质．; 3．实验方法与步骤 (1)提取细胞核物质： (2)溶解核内的DNA． (3)析出DNA黏稠物： (4)滤取DNA黏稠物： 。; (5)DNA黏稠物再溶解，取含DNA的黏稠物故于烧杯内，加入物质的量浓度为2mol／L的NaC[溶液20mL，用玻璃棒向一个方向不停搅拌3min，使黏稠物尽可能多地溶解。 (6)过滤含DNA的氧化钠溶液：用两层纱布过滤DNA的氯化钠溶液，取其滤液． (7)提取含杂质较少的DNA：在滤液中加入冷却的无水乙醇，并用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌．由于DNA不溶于酒精，会出现乳白色丝状物，用玻璃棒将丝状物卷起，井用滤纸吸去表面的水分． (8)DNA的鉴定：两支试管中各加入物质的量浓度为0.015mol／L的氧化钠溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，搅拌使其充分熔解后．向两支试管中分别加入4mL二苯胺试剂，混匀后置于沸水浴中加热5min．待试管冷却后，比较两试管的颜色变化，将发现加入DNA的试管中溶液呈蓝色，从而鉴定DNA的存在．; 4．注意事项 (1)制备鸡血细胞液时．要在取新鲜鸡血的同时 。 (2)获取较多DNA的关键是 ，以便使细胞膜和核膜破裂，核内物质释放出来。 (3)实验中共3次过滤。过滤时使用的纱布层数与取其滤液或粘稠物有关． (4)实验中有6次搅拌，; (5)实验中有两次使用蒸馏水．一次在第一步．加水是为了使血细胞吸水膨胀破裂，加水后必须充分搅拌．不应少于5min，使血细胞充分破裂，第二次加蒸馏水是在第三步，加水是为了稀释氯化钠溶液。; (8)本实验成功的关键 (9) 5. 实验现象与讨论 最后一次搅拌时． 出现，这就是DNA．用 。; 典例分析 例 在DNA的粗提取实验过程中，先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是 ( ) (A)稀释血液．冲洗样品 (B)使血细胞破裂、降低NaCI浓度使DNA析出 (C)使血细胞破裂、增大DNA溶解量 (D)使血细跑破裂，提取含杂质较少的DNA 解析；第一次加入蒸馏水的作用是使血细胞过度洗水而破裂，以便核内物质释放．第二次如入适量蒸馏水，是为了降低 NaCl溶液浓度，使DNA因溶解度达到最小而析出．; 挑战误区 例，下列操作中．对DNA的提取量影响较小的是 ( ) (A)使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质 (D)搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动 (C)在析出DN