354.大鼠肺微血管内皮细胞的培养.pdf

·16 · J Ch in M icrocirc Feb. 2007, Vol. 11,No. 1 文章编号 :(2007) 0 100 1604 ·实验研究 · 大鼠肺微血管内皮细胞的培养 △ 陈瑞华 ,赵 自刚 ,牛春雨 ,张 　静 ,张玉平 ( ) 【摘要 】　目的　建立简单有效地获取大鼠肺微血管内皮细胞 PMV EC 的培养方法 。方法 　从实 验动物 、培养基 、植块方法 、胎牛血清浓度等方面对植块培养法进行改进 ,应用 W istar雄性大鼠的肺组 织 ,进行 PMV EC 的原代培养并传代培养 ;通过倒置显微镜 、扫描 、透射电镜观察其形态 ,并进行免疫组 织化学鉴定 。结果 　体外培养的大鼠 PMV EC呈梭形或多角形 ,形成单层后呈典型的鹅卵石样或铺路 石样排列 ,获得的血管内皮细胞纯度较高 ,抗 Ⅷ因子阳性反应 ,成功建立了 PMV EC 的原代培养方法 。 结论 　改进的植块培养法简便 、可靠 ,获得的 PMV EC纯度高 ,生长状态良好 ,保持了内皮细胞的结构和 功能 ,可用于其功能特性的进一步研究 。 【关键词 】　肺微血管 ; 内皮细胞 ;细胞培养 中图分类号 : Q25　　　　文献标识码 : B Culture of Pulm onary M icrova scular Endothelia l Cells in Ra ts CH EN R u ihua, ZHA O Z ig ang, N IU Chuny u, ZHAN J ing, ZHAN G Yup ing. D ep a rtm en t of P a thop hy s io lo lgy, H ebe i N orth Un ivers ity, Z hangj iakou 075029, Ch ina 【Ab stract】　O bjective　To develop a simp le and rep roductab le m ethod for the iso lation and p rim ary cu ltu re of p u lmonary m icrovascu lar endothelial cells (PMV EC s) of rats. M ethods　The tissue b lock p a sted cu ltu re m ethod was imp roved in exp erim ent an im al, cu ltu re - m edium , tissue b lock m ethod, fetal bovine ser um (FB S) and sp reading slide m ethod. R ats PMV EC s were p rim ary cu ltu red w ith lung tissue b lock p a sted m ethod s u sing lung tissue of m ale W istar rats, and the cell morphology was ob served u sing inverted m icro scop e and electron m icro scop e, and iden tified u sing imm unoh istochem ical m ethod s. Results　The cu ltured PMV EC s of rats in vitro showed fu siform shap e or polygon, and the monolayer cu ltu re s disp layed a typ ical cobb le stone or p avingstone morp ho logy and were inh ib ited w