【2017年整理】MDCK细胞培养技术.doc

2017整理动物细胞培养和核移植技术(讲课).ppt 一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。探究有关概念 4、应用大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）基因工程的受体细胞培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 ① 成功率低 ② 克隆动物存在健康问题 ③ 克隆动物食品的安全性问题存有争议思考题 * 动物细胞培养 动物细胞融合单克隆抗体制备动物细胞核移植常用技术手段（基础） 1、概念：原理：细胞增殖动物胚胎或幼龄动物的

2017-01-28 约2.18千字 20页立即下载

2017整理2.2.1_动物细胞培养和核移植技术(苗).ppt 思考题思考题思考题思考题请总结出动物细胞培养的定义动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。思考题　　将动物的一个细胞的＿＿＿，移入一个已经去掉＿＿＿的＿＿细胞中，使其＿＿并发育成一个新的＿＿，这个新的胚胎最终发育为动物个体。　　分类　　胚胎细胞核移植、体细胞核移植整个过程用了哪些技术？ 细胞培养、核移植、胚胎移植新生牛的性别、基因？与供体相同繁殖方式？无性繁殖原理？动物细胞核的全能性对比：动物细胞培养、植物组织培养（ MⅡ卵母细胞）减数第二次分裂中期 2.结合P48图2-21，叙述克

2017-01-27 约字 47页立即下载

2017整理2-第2节动物细胞培养和核移植技术课件.ppt 专题二第2节动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、生产单克隆抗体技术一、动物细胞培养 1.概念：就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。一、动物细胞培养 一、动物细胞培养 细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制(即细胞在培养中只能形

2017-01-31 约4.54千字 39页立即下载

【2017年整理】细胞培养基本知识基本技术.ppt 细胞培养的基本知识、基本技术 ;主要内容：;一、 细胞培养;培养细胞的特性1 -生长方式及类型;培养细胞的特性2 - 增殖特点;贴附-伸展;接触抑制;细胞增殖密度抑制;培养细胞的特性3 -生长过程;高等生物体，细胞周期时间的长短变化主要集中在G1期，S，G2和M期基本保持稳定。 Hela 8-16h 5-9h 2-8h 20-28h ;一群细胞的增殖：细胞生长曲线; 潜伏期/滞留期指数增长期平台期/停滞期退化或死亡 ;细胞系的生长过程细胞系：原代培养细胞经首次传代成功后即成为细胞系，可泛指一般可以传代的细胞。细胞株：通过筛选或克隆化，从原代细胞或

2017-06-07 约4.08千字 88页立即下载

【2017年整理】细胞培养技术在肿瘤学研究中的应用1.doc 细胞培养技术在肿瘤学研究中的应用（姓名：缪延栋学号：2008275 昆明医学院第一附属医院）【关键词】：细胞培养技术 肿瘤【摘要】恶性肿瘤是危害人类生命健康最严重的疾病之一，是细胞性疾病。在人体内研究单个肿瘤细胞或某一类细胞的功能活动十分困难，将活细胞在体外研究则方便得多，这首先要求在体外进行细胞培养，培养肿瘤细胞可为癌变机理的探讨，肿瘤生物学特性的研究、临床诊断、药物筛选以及抗肿瘤单克隆抗体的制备等方面的研究，提供良好的细胞实验模型。尤其在实验肿瘤学研究中，细胞培养于后基因组学时代日益显出其重要性——因为作为一种泛基因组分析方法，它使得研究者能藉以分析基因组改变对细胞的影

2017-01-21 约5.14万字 36页立即下载

【2017年整理】细胞培养技术考试重点.doc 名词解释：1.群体倍增时间：细胞指数增长期时，细胞群倍增所需的时间。是由于表示群体细胞指数生长期内细胞分裂活动的程度，是判断细胞生长是否旺盛的重要指标。2.接触抑制（ HYPERLINK javascript:void(0); contact? HYPERLINK javascript:void(0); inhibition）：细胞相互接触后失去运动的现象。3.密度抑制（density ? HYPERLINK javascript:void(0); inhibition）：由于细胞密度过大，培养液营养耗尽，代谢产物过多和生存空间消失所引起的细胞增殖的抑制现象。4.肿瘤干细胞(tumor ste

2017-01-16 约2.86万字 18页立即下载

【2017年整理】原代细胞培养与分离.docx 原代细胞的培养与建系凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。细胞的纯化或细胞克隆技术是细胞培养工作的基础。第一节原代细胞的取材人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。一、取材的基本要求.1．取材要注意新鲜和保鲜.2．应严格无菌.3．防止机械损伤.4．去除无用组织和避免干燥.5．应注意组织类型、分化程度、年龄等.6．作好记录二、各类组织的取材技术皮肤和粘膜的取材内脏和实体瘤的取材血液细胞的取材骨髓、羊水、胸/腹水细胞取材动物组织取材人胚体组织取材鸡（鸭）鸟类胚胎组织取材鸡（鸭）鸟类胚胎组织取材皮肤和粘膜的取材.主要取

2017-01-14 约字 21页立即下载

【2017年整理】细胞培养方法与步骤.ppt 新生小鼠心肌细胞分离培养的改良及其鉴定目录一、实验目的二、细胞来源三、实验方法 1.细胞培养 2.实验操作 3.检测方法四、预期实验结果实验目的通过改进新生小鼠心肌分离及其原代培养方法提高心肌细胞的活性和纯度构建新生小鼠心肌细胞分离及原代培养实验平台体外培养的原代心肌细胞具有自发节律性和收缩性特征，能够保持其在体内原有的许多结构和功能，同时排除了神经体液等因素的干扰，可以从细胞分子水平阐明一些心脏发育及疾病发生的基本理论，在心肌细胞生长发育生理代谢病理等研究中具有重要作用. 细胞来源出生0~3 d的清洁

2017-06-08 约3.67千字 13页立即下载

【2017年整理】细胞培养基础篇.doc 细胞培养基础篇基础篇-无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70% ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70% ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。 2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以

2017-06-06 约4.94千字 4页立即下载

【2017年整理】264.7未处理细胞培养.doc 抗坏血酸抑制核因子κB受体活化子配体诱导RAW264.7细胞的分化和功能肖新华周厚德袁凌青谢辉廖二元作者单位：410011长沙，中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所【摘要】目的研究抗坏血酸对核因子κB受体活化子配体（RANKL）诱导体外培养的破骨前体细胞RAW264.7形成成熟多核破骨细胞的影响，探讨抗坏血酸在破骨前体细胞分化中的作用及机制。方法利用不同浓度的抗坏血酸与RANKL单独或共同处理RAW264.7细胞，MTT法测定细胞增殖，抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色法观察TRAP阳性多核细胞,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定破骨

2017-01-12 约1.45万字 29页立即下载

【2017年整理】细胞培养上清的收集.doc 消可宁对葡萄糖诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氮合酶表达变化的抑制作用 ???? 【摘要】目的探讨消可宁对葡萄糖（GS）诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氮合酶（iNOS）表达变化的影响。方法? 培养人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞，用30 mol/L GS处理3h，用生理盐水、10－７ mol/L CCK8和0１ mg/L GS+10－６、10－７、１０－８? mol/L CCK8处理16 h；用比色法检测培养液中一氧化氮(NO)含量、细胞NOS活性，免疫细胞化学及蛋白质免疫印迹法检测iNOS蛋白表达。结果? 与生理盐水处理的对照组比较，GS诱导培养液NO含量增多、细胞NOS活性增高、iNO

2017-01-16 约2.67万字 10页立即下载

【2017年整理】细胞培养完整手册.doc - PAGE 5 - 细胞培养完整手册常用设备准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品柜（放置消毒过的物品）、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、 PH 计（测量培养用液 PH 值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。培养室的设备：液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（ -80℃ 必须放在无菌间的设备：离心机（收集细胞）、超净工作台、倒置显微镜、 CO2 孵箱（孵育培养物）、水浴锅、三氧消毒杀菌机、 4℃ 无菌操作基本技术无菌室的灭菌： 1.定期打扫无菌室：每周打扫一

2017-01-17 约6.51万字 41页立即下载

【2017年整理】细胞培养操作指南.doc 细胞培养操作指南1，原代细胞培养原代培养需要严格要求：（1）取材时需要去除脂肪和坏死的组织(2)为减少对组织的损伤，需用锋利的器具(3)适度离心以去除用于解离的酶（4）由于原代培养组织细胞的存活率很低，故用于原代培养的细胞的密度应高于正常的传代培养的细胞密度。（5）营养丰富的培养基比单一的培养基更可取，如果要添加血清，胎牛血清比牛马的血清更好。(6)对于取材部位易于感染（如皮肤）应先用70%乙醇消毒，在无菌条件下切除组织，尽快转移入BSS或培养基中。不要再培养室取材，因为动物可引入微生物污染。若必须推迟，可保存在4℃1. 剪切组织先将所取得的组织，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表

2017-01-17 约6.59万字 63页立即下载

【2017年整理】细胞培养及材料细胞毒性检测.ppt 物品培养室工作台玻璃制品金属器械塑料制品橡胶制品培养用液布类棉类湿热＋＋＋＋＋干热＋＋＋过滤＋紫外＋化学气体＋＋＋消毒剂＋＋＋＋电离辐射＋＋＋＋ Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 贴附生长型细胞必须贴附于底物才能生长的细胞。从形态上大体分为上皮细胞型及成纤维细胞型，还有一

2017-06-06 约7.68千字 48页立即下载

细胞培养技术.ppt 试剂标注规范试剂名称 NaCl 配制浓度 0.5 mM 配制人张三配制日期 2016.10.21 细胞复苏（快融）（l）从液氮中取出冷冻管，迅速投入37℃水浴中，使其融化（1分钟左右）。并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。（2）用培养液稀释后低速离心10分钟。（3）去上清，加新鲜培养液培养刚复苏的细胞。（4）隔天换液，但贴壁细胞若未贴壁则勿需处理。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶而损伤细胞。细胞传代 ? ? 细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为

2018-12-22 约5.06千字 54页立即下载