牛奶中蛋白质含量测定 牛奶中蛋白质含量的测定----凯氏定氮法.doc
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牛奶中蛋白质含量测定 牛奶中蛋白质含量的测定----凯氏定氮法
牛奶中蛋白质含量的测定 ---- 凯氏定氮法 一:实验目的:掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理 学会凯氏定氮法的操作技术 二:实验原理:蛋白质的含氮量较恒定,一般为 16%,上下略有浮动 N/16%=N*6.25=蛋白质的含量 样品与浓硫酸和催…
平凡而不平庸 我是一名普通的志愿者,每一次志愿服务活动的精彩,每一次活动时的紧张,每一次活动后的收获,点点滴滴,成为了我人生难忘的回忆。是志愿服务让我不再胆怯、不再畏惧挑战,让我更有信心的面对未来;是在志愿服务活动中让我找到了“奉献 友爱 互助 进步…
我眼中的大学生活 学校里的秋叶又一次落了,此时的我才猛然醒悟,大一就这样走完了。回首这一年的点点滴滴,不胜感慨。 还记得刚来学校报到的时候,一进大门,两座崭新对称的教学楼矗立在眼前,楼道里笑声不断,生机勃勃。放眼望去,前面是一片开阔的广场。穿过熙熙攘…
牛奶中蛋白质含量的测定
---- 凯氏定氮法
一:实验目的:掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理
学会凯氏定氮法的操作技术
二:实验原理:蛋白质的含氮量较恒定,一般为 16%,上下略有浮动 N/16%=N*6.25=蛋白质的含量
样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳
和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨
与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收,
再以标准盐酸溶液滴定,测出释放的氨含量,并计算氮素含量,
再乘以6.25即为蛋白质的含量。
整个过程分三步:消化、蒸馏和吸收、滴定
1:消化:蛋白质 + H2SO4 → (NH4)2SO4 + SO2↑+ CO2
↑+ H2O
瓶颈45度角倾斜
2:蒸馏:消化液 + 氢氧化钠加热蒸馏,放出氨气
2NaOH+ (NH4)2SO4= 2NH3 ↑ + Na2SO4 +
2H2O
3:吸收与滴定(1)用4%硼酸吸收
(2)用盐酸标准溶液滴定
(3)混合指示剂(甲基红—溴甲基酚绿混合
指示剂)
指示剂:红色———→绿色 ———→红色
(酸)吸收 (碱) 滴定 (酸)
3NH3 + H3BO3→ (NH4)3BO3
(NH4)3BO3+ 3HCl → 3NH4Cl + H3BO3
三:实验步骤
1、消化:准确量取牛奶0.5mL,移入干燥的凯氏烧瓶中(勿粘附在瓶壁
上),加入0.2g硫酸铜、0.3g硫酸钾、10mL浓硫酸,小心摇匀,
于通风橱内消化(先小火,待炭化完全后,加大火力至溶液呈蓝
绿色),冷却至室温,定容至25mL。
同时消化一份空白试剂为对照。
2、蒸馏、吸收
取40mL硼酸溶液于锥形瓶中,加2d混合指示剂,置于冷凝管下端,为接受瓶。
量取5mL样品消化液由加料口加入反应室,用5mL蒸馏水冲洗加料口,再加入40%NaOH10mL(溶液呈蓝褐色),不要摇动,立即封
口。
夹紧缓冲管下口,开始蒸馏,当接收瓶溶液颜色变化时,继续蒸馏3-5min,下降接收瓶,使硼酸液面离开冷凝管口,继续蒸馏1min,
用蒸馏水淋洗浸入硼酸的管外壁,移出接收瓶,滴定。
3、滴定
用0.01mol/L的盐酸标准溶液滴定接收瓶内的反应液
同时做空白对照
W—蛋白质的质量分数,%;
c—盐酸标准液的浓度,mol/L;
1—空白滴定消耗标准盐酸液量,mL; V2—样品滴定消耗标准盐酸液量,mL; m—样品体积,mL;
0.014—氮的毫摩尔质量,g/mmol; F—蛋白质系数。
×5
牛奶中蛋白质含量的测定 ---- 凯氏定氮法 一:实验目的:掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理 学会凯氏定氮法的操作技术 二:实验原理:蛋白质的含氮量较恒定,一般为 16%,上下略有浮动 N/16%=N*6.25=蛋白质的含量 样品与浓硫酸和催…
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