实验八、培养基配制与灭菌课件.ppt
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实验八、培养基的配制与灭菌 目 的 要 求 了解培养基的配制原理和方法,掌握其配制过程。 了解几种灭菌方法,掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。 实 验 材 料 药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖;可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O等。 高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、细菌过滤器、紫外线杀菌灯。 其它:天平、牛角匙、电炉、1N HCl、1N NaOH、pH试纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、带玻璃珠的三角瓶、带棉塞的无菌试管、无棉塞的空试管、培养皿、吸管、各种包装纸、防水纸、绳索、棉花、标签等。 方法与步骤 培养基的配制 分离培养微生物常用器皿的准备 培养基和玻璃器材的灭菌方法 培养基的配制方法和步骤 称量:按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。 溶化:在搪瓷杯中加入所需水量,玻棒搅匀,加热溶解。 调pH值:用1N NaOH或1N HCl调pH,用pH试纸对照。 加琼脂溶化:加热过程中要不断搅拌,可适当补水。 分装:注意不要污染棉塞。 包扎成捆,挂上标签(必须用铅笔写),注明何种培养基。 灭菌备用:培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h,确定无菌生长,方可使用。 方法与步骤 (培养基的配制方法和步骤) 方法与步骤 (培养基的配制方法和步骤) 方法与步骤 (几种培养基的配方及配制) 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(用于分离和培养细菌,是一种天然培养基)配方如下: 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g 氯化钠 5g 琼脂 20g 自来水 1000mL pH 7.2~7.4 灭菌 1.05kg/cm2,20min 淀粉琼脂培养基(高氏一号Gause′1),用于分离和培养放线菌,是一种合成培养基。配方如下: 可溶性淀粉 20.0g KNO3 1.0g K2HPO4 0.5g MgSO4? 7H2O 0.5g NaCl 0.5g FeSO4? 7H2O 0.01g
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