实验八、培养基配制与灭菌课件.ppt

实验八、培养基的配制与灭菌 目 的 要 求 了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。 了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。 实 验 材 料 药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O等。 高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、细菌过滤器、紫外线杀菌灯。 其它：天平、牛角匙、电炉、1N HCl、1N NaOH、pH试纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、带玻璃珠的三角瓶、带棉塞的无菌试管、无棉塞的空试管、培养皿、吸管、各种包装纸、防水纸、绳索、棉花、标签等。 方法与步骤 培养基的配制 分离培养微生物常用器皿的准备 培养基和玻璃器材的灭菌方法 培养基的配制方法和步骤 称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。 溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。 调pH值：用1N NaOH或1N HCl调pH，用pH试纸对照。 加琼脂溶化：加热过程中要不断搅拌，可适当补水。 分装：注意不要污染棉塞。 包扎成捆，挂上标签（必须用铅笔写），注明何种培养基。 灭菌备用：培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。 方法与步骤 （培养基的配制方法和步骤） 方法与步骤 （培养基的配制方法和步骤） 方法与步骤 （几种培养基的配方及配制） 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（用于分离和培养细菌，是一种天然培养基）配方如下： 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g 氯化钠 5g 琼脂 20g 自来水 1000mL pH 7.2~7.4 灭菌 1.05kg/cm2，20min 淀粉琼脂培养基（高氏一号Gause′1），用于分离和培养放线菌，是一种合成培养基。配方如下： 可溶性淀粉 20.0g KNO3 1.0g K2HPO4 0.5g MgSO4? 7H2O 0.5g NaCl 0.5g FeSO4? 7H2O 0.01g