实验培养基的配制、消毒与灭菌.ppt

干热灭菌干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。干热灭菌有火焰灼烧灭菌和热空气灭菌两种。细胞内蛋白质的凝固性与其含水量有关。在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白蛋凝固就越快，反之凝固缓慢。因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要高（160～170℃），时间要长（1～2h），但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸气急剧将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀，继续加热。由于水蒸气无法排出，增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌目的。01一般培养基在0.1MPa下，121℃维持15～30min可达到彻底灭菌的目的。灭菌的温度及维持的时间随灭菌物品的性质和容量等具体情况而有所改变。02高压蒸气灭菌实验一培养基的制备

消毒与灭菌

培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。1人工制备培养基的目的，在于给微生物创造一个良好的营养条件。2培养基配制实验原理01营养：碳源、氮源、能源、生长因子、水分和无机盐；03一定的氧化还原电位；02适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力；04合适的渗透压。培养基配制要素根据微生物的种类和实验目的的不同，培养基分类可以按以下方式：01按成分的不同分02按培养基的物理状态分按培养基的用途分03培养基的分类1天然培养基:主要成分是复杂的天然有机物质2合成培养基:用化学成分完全了解的纯化合物药品配制而成的培养基3半合成培养基:以天然有机物作为微生物营养来源的同时，适当补充一些成分已知的化学药品所配制的培养基按照培养基的成分来分1液体培养基：不含任何凝固剂32半固体培养基：加入少量凝固剂，如0.2%~0.7%琼脂固体培养基：加入凝固剂，如1.5%~2.0%琼脂按照培养基的物理状态01040203基础培养基营养培养基（加富培养基）鉴别培养基：含有特定化合物或试剂。某种微生物在这种培养基上培养后，它所产生的某种代谢产物与这种特定的化合物或试剂能发生某种明显的特征性反应，根据这一特征性反应可以将某种微生物与他种微生物区别开来。选择培养基：利用微生物对某种化学物质的敏感性不同，在培养基中加入这类物质，抑制不需要的微生物生长，而利用所需分离的微生物生长，从而达到分离或鉴别某种微生物的目的。按照培养基的用途分配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物微生物生长繁殖：消耗养分改变培养的酸碱度产生毒素或者抑制物培养基灭菌010203040506牛肉膏：3g蛋白胨：10gNaCl：5g琼脂：15-20g水：1000mLpH：7.4~7.6牛肉膏蛋白胨培养基的制备应用最广泛的细菌基础培养基，普通培养基马铃薯培养基（PDA）的制备用来培养真菌马铃薯：200g蔗糖（葡萄糖）20g琼脂：15-20g水：1000mLpH：自然马铃薯去皮，切成块煮沸30分钟，然后用纱布过滤；滤液中加入糖和琼脂，溶化后补足水至1000mL。高氏Ⅰ号培养基的制备用来培养放线菌可溶性淀粉：20gKNO3：1gNaCl：