SNT 1951-2007进出口保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1951—2007进出口保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的检测方法液相色谱-质谱/质谱法Determination of vardenafil , sildenafil and tadalafil in healthfoods for import and export-LC-MS/MS method2008-03-01实施2007-08-06 发布中华人民共和国发烫1惑发布数码防伪国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1951-2007前言本标准的附录 A和附录 B均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国湖南出人境检验检疫局起草本标准主要起草人：王美玲、万向阳、戴华、李拥军、王正良、王象贤、黄萍本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。I SN/T 1951—2007进出口保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的检测方法液相色谱-质谱/质谱法范围本标准规定了保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于片剂、胶囊剂和口服液剂类保健食品中伐那非、西地那非、他达那非的检测。2测定方法2.1方法提要片剂、胶囊剂试样中的伐地那非、西地那排、他达那非用甲醇超声提取，提取液经稀释后过滤。口服溶液剂经直接稀释后过滤，用配有电喷雾禽子源的液相色谱-质谱/质谱仪进行测定，外标法定量。2.2试剂和材料所有试剂除特殊注明外,均为分析纯,水为二次蒸馏水2.2.1乙睛：高效液相色谱级2.2.2甲醇：高效液相色谱级2.2.3冰乙酸：优级纯。2.2.4盐酸：优级纯。 mol/L盐酸+甲醇混名液(9+1,本积比）2.2.6伐地那非(vardenafil,CAS 号：224785/90-4,分子式:C23 HN.O,S·HCl·3H,O)标准品：纯度大于等于99.5%。2.2.7西地那非（SildenafillCAS号：139155-83-2，分子式：C223oNsO,S）标准品：纯度大于等于99.5% .2.2.8他达那非（tadalafil,dAS.号171596-29-5，分子式：22H1gNjO4）标准品：纯度大于等于99.5%。2.2.9标准溶液：分别准确称取适量伐地那非、洒地那非、他达娜非标准品，用甲醇配制成浓度为10 μg/mL的混合标准储备液，车·4℃下保存。根据需要用0.1:me1/L盐酸十甲醇混合液（2.2.5)将标准储备液稀释成1 ng/mL、2 ngxmL、4 ng/mL、10°ng/mL、50²ng/mL、100 ng/mL的混合标准工作溶液。2.3仪器和设备2.3.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：三重四极杆质谱检测器，配电喷雾离子源(ESI)。2.3.2超声波清洗器。2.3.3旋涡混匀器。2.3.4电子天平：感量1mg。2.3.5 研钵。2.4测定步骤2.4.1试样的制备2.4. 1. 1 片剂随机取同一批号的供试品20片，研细为试样。 SN/T 1951—200硬胶囊随机取同一批号的供试品20粒，倾出所有内容物，研细为试样。软胶囊随机取同一批号的供试品20粒，将内容物全部挤到一离心管中，充分混匀后，作为试样。口服溶液剂随机抽取同一批号的供试品10支（瓶），取等量体积样品到同一容器中混匀，作为试样。2.4.2提取片剂、硬胶囊、软胶囊试样称取1g试样（精确到0.01g)于100mL容量瓶中，加人90mL甲醇，盖上盖混匀，置于超声波清洗器中超声 1 h,冷却至室温后用甲醇定容至刻度,混匀。取 1.0 mL于 10 mL容量瓶中,用 0.1 mol/L盐酸十甲醇混合液（2.2.5)定容后混匀，溶液过0.45μm微孔滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。口服溶液剂准确移取1.0mL试样于10 mL容量瓶中，用0.1mol/L盐酸十甲醇混合液(2.2.5)定容,混匀，溶液过0.45μm微孔滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。2.4.3测定液相色谱-质谱/质谱条件a)色谱柱：柱填料为十八烷基硅烷键合相的色谱柱，2.1×150mm，5um或相当者；b)流动相：梯度洗脱程序见表1；c)流速:0.20 mL/min;d)柱温：40℃;e)进样量:10 μL;f)离子源：电喷雾离子源；g)扫描方式：正离子；h)检测方式：多反应监测（MRM);i)雾化气、窗帘气、辅助加热气、碰撞气等气体使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件参见附录A；j)喷雾电压、去集簇电压、碰撞能等电压值应优化至最优灵敏度，参考条件参见附录A；k）监测离子对（m/z）：他达那非390.4/268.3（定量离子对）、390.4/135.1、390.4/169.1；西地那非475.3/100.1（定量离子对）、475.3/58.0、4