SNT 1865-2007进出口动物源食品中甲砜霉素、氟甲砜霉素残留量的检测方法 液相色谱-串联质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1865—2007进出口动物源食品中甲霉素、氟甲砜霉素残留量的检测方法液相色谱-串联质谱法Determination of thiamphenicol and florfenicol residues in animal-derivedfood for import and export-LC-MS/MS method2007-10-16实施2007-04-06 发布中华人民共和国按线510015查动发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1865-2007前言本标准的附录 A为资料性附录本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国浙江出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：朱晓雨、谢文、丁慧瑛、黄雷芳、奚君阳、钱艳。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1865—2007进出口动物源食品中甲霉素、氟甲砜霉素残留量的检测方法液相色谱-串联质谱法1 范围本标准规定了动物源食品中甲砜霉素、氟甲矾霉素残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于虾、鱼、禽肉、肠衣和蜂蜜中甲砜霉素、氟甲砜霉素残留量的检测。2测定方法2.1方法提要在碱性条件下用乙酸乙酯提取样品中甲砜霉素、氟甲砜霉素，正已烷脱脂，C18固相萃取小柱净化，液相色谱-串联质谱测定和确证,外标法定量。2.2试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。2.2.1乙酸乙酯：高效液相色叠级。2.2.2正已烷：高效液相色谱级2.2.3甲醇：高效液相色谱级。2.2.4氯化钠。2.2.5无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。2.2.6氨水:25%~28% 。15%氯化钠水溶液：15g氯化钠溶解寺100mL水中。2.2.7乙酸乙酯：氨水（97：3,体积比）。2.2.8甲霉素标准品（thiamphenicol,CAS NO.15318-45毫,CizHl;Cl2NO,S):纯度大于等于 99%。2. 2.9氟甲砜霉素标准品(l1orfenicol,CAs NO.76639-94/C12HsCl,NO,S)：纯度大于等于 99%。2.2. 10甲砜霉素标准储备溶液：称取0.010 0 g 电砜霉素标准品,用甲醇溶解定容至 100 mL，溶液浓2.2. 11度为100 μg/mL。1℃～4℃冷藏保存。2.2.12氟甲霉素标准储备溶液：称取0.0100g氟甲砜霉素标准品，用甲醇溶解定容至100mL，溶液浓度为100μg/mL。1℃～4℃冷藏保存。2.2.13混合标准工作溶液：临用前根据需要用甲醇：水（1：1，体积比)稀释至适当浓度作为混合标准工作液，1℃～4℃冷藏保存。2.3仪器和设备2.3.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。2.3.2旋转蒸发器。2.3.3粉碎机。2.3.4均质器。2.3.5旋涡混合器。2.3.6[固相萃取柱：C1s固相萃取小柱，500mg，或相当者。甲醇和水各5mL预洗。2.3.7无水硫酸钠柱：80mm×40mm（内径）筒形漏斗，底部垫5mm脱脂棉，再装50mm无水硫酸钠。 SN/T 1865—20072.4测定步骤2.4.1制样a）虾、鱼、禽肉、肠衣：从所取全部虾、鱼或禽肉样品中取出有代表性样品约500g，用粉碎机粉碎；从所取肠衣样品中取出有代表性样品约300g，用剪刀剪碎，混合均匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。将试样于一18℃冷冻保存。蜂蜜：取500g代表性蜂蜜样品，未结晶的样品将其用力搅拌均匀，有结晶析出的样品可将样品b）瓶盖塞紧后，置于不超过60℃的水浴中温热，等样品全部熔化后搅匀，迅速冷却至室温。在熔化时应注意防止水分挥发。制备好的试样均分成两份，分别装入样品瓶中，密封，并标明标记。将试样室温下保存。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。2.4.2提取虾、鱼、禽肉：称取5g试样(精确到0.01g)置于50mL具塞离心管中，加25mL碱性条件下a）乙酸乙酯（2.2.8），在均质器中以14000r/min均质30s，以3000r/min离心5min，将上层乙酸乙酯提取液过无水硫酸柱，收集于浓缩瓶中，样品残渣再加人20mL碱性条件下乙酸乙酯（2.2.8），重复上述操作，合并乙酸乙酯提取液，在50℃以下水浴减压浓缩至近干,用4mL正已烷和4mL水依次将残渣转移至10mL具塞玻璃离心管中，于旋涡混合器上以2000r/min，混勾1min，以2000r/min离心3min,弃去上层正已烷溶液，再加人4mL正已烷，重复上述操作。肠衣：称取5g试样(精确到0.01g)置于50mL具塞离心管中,加25mL碱性条件下乙酸乙b)|酯（2.2.8），于旋涡混合器上以2000 r/m