SN／T 2300-2009_国境口岸蚊类携带基孔肯雅病毒的检测方法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ／ — 犛犖犜２３００ ２００９ 国境口岸蚊类携带基孔肯雅病毒的 检测方法 ㅤㅤㅤㅤ行业标准 犇犲狋犲犮狋犻狅狀狅犳犿狅狊狌犻狋狅犫狅狉狀犲犮犺犻犽狌狀狌狀犪狏犻狉狌狊犪狋犳狉狅狀狋犻犲狉 狅狉狋 狇 犵 狔 狆 ２００９０７０７发布 ２０１００１１６实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总局 ／ — 犛犖犜２３００ ２００９ 国境口岸蚊类携带基孔肯雅病毒的 检测方法 １ 范围 　 本标准规定了国境口岸蚊类携带基孔肯雅病毒的检测方法，包括标本采集、处理、检测程序、结果判 定及报告。 本标准适用于国境口岸蚊类携带基孔肯雅病毒的实验室检验。 ２ 规范性引用文件 　 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是未注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 ＧＢ１９４８９ 实验室 生物安全通用要求 　 　 ３ 术语和定义 　 下列术语和定义适用于本标准。 ３．１ 基孔肯雅病毒 犮犺犻犽狌狀狌狀犪狏犻狉狌狊 ㅤㅤㅤㅤ行业标准 　 犵 狔 基孔肯雅病毒是单股ＲＮＡ病毒，属于披膜病毒科甲病毒属。病毒颗粒呈球形，平均直径４２ｎｍ，相 对分子质量为 ８，沉降系数为 。该病毒感染人可引起基孔肯雅热，主要临床表现为发热、关 ４．３×１０ ４６Ｓ 节疼痛、皮疹和轻度出血等。本病潜伏期 ３ｄ １２ｄ，伊蚊是其主要传播媒介。 ～ ３．２ 实时荧光犚犜犘犆犚 狉犲犪犾狋犻犿犲犳犾狌狅狉犲狊犮犲狀犮犲犚犜犘犆犚 　 实时荧光 ＲＴＰＣＲ方法是在常规 ＲＴＰＣＲ的基础上，加入一条特异性的荧光探针。该探针为一段 寡核苷酸，两端分别标记一个报告基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被 淬灭基团吸收； 扩增时，利用 酶的 ’ ’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭 ＰＣＲ 犜犪狇 ５３ 基团分离，从而荧光监测系统可以接收到荧光信号。每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经 历的循环数，用 值（ ）表示。 Ｃｔ ｃｃｌｅｔｈｒｅｓｈｏｌｄ ｙ ４ 实验室生物安全要求 　 基孔肯雅病毒培养和动物感染实验应在生物安全三级（ ）实验室内进行。 ４．１ ＢＳＬ３