实验6酶的特异性.ppt

实验六酶的特异性生物化学实验之－－山东师范大学生命科学学院【实验原理】酶是生物催化剂，酶对所作用的底物有严格的选择性，即酶的特异性。淀粉和蔗糖都是非还原性糖，分别为唾液淀粉酶和蔗糖酶的专一底物。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有还原性的麦芽糖，蔗糖被蔗糖酶水解生成具有还原性的葡萄糖和果糖。Benedict试剂（含有Cu2+）常用于检验还原糖的存在，其被还原后生成砖红色的Cu2O沉淀。【实验目的】

学习酵母蔗糖酶（粗提液）和唾液淀粉酶的制备，了解酶的特异性及检测方法。单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。您的内容已经简明扼要，字字珠玑，但信息却千丝万缕、错综复杂，需要用更多的文字来表述；但请您尽可能提炼思想的精髓，否则容易造成观者的阅读压力，适得其反。正如我们都希望改变世界，希望给别人带去光明，但更多时候我们只需要播下一颗种子，自然有微风吹拂，雨露滋养。恰如其分地表达观点，往往事半功倍。当您的内容到达这个限度时，或许已经不纯粹作用于演示，极大可能运用于阅读领域；无论是传播观点、知识分享还是汇报工作，内容的详尽固然重要，但请一定注意信息框架的清晰，这样才能使内容层次分明，页面简洁易读。如果您的内容确实非常重要又难以精简，也请使用分段处理，对内容进行简单的梳理和提炼，这样会使逻辑框架相对清晰。【器材及试剂】恒温水浴锅2.试管及试管架离心机4.吸量管烧杯、量筒、漏斗等器材：2%蔗糖1%淀粉（内含0.3%的NaCl）唾液淀粉酶溶液蔗糖酶溶液Benedict试剂试剂：【实验步骤】淀粉酶的特异性唾液淀粉酶溶液的制备：先用蒸馏水漱口，然后用洁净试管1支，取唾液（无泡沫）约2ml，蒸馏水20倍稀释，备用。2.取试管5支，标号，按下表所列的次序操作：试剂试管编号123451%淀粉溶液（ml）1.0—1.0——2%蔗糖溶液（ml）—1.0—1.0—唾液淀粉酶（ml）——1.01.01.0蒸馏水（ml）1.01.0——1.0摇匀，置37℃恒温水浴保温10min，然后每管加入Benedict试剂2ml，再放沸水浴5min。观察各管颜色变化，并解释实验结果。PARTONE(二)蔗糖酶的特异性蔗糖酶溶液的制备：取活性干酵母1.0g，置于研钵中，加少量蒸馏水及石英砂研磨提取约10min，再加蒸馏水至总体积约为20ml，过滤或离心，滤液或上清液备用。2.取试管5支，标号，按下表所列的次序操作：试剂试管编号123451%淀粉溶液（ml）1.0—1.0——2%蔗糖溶液（ml）—1.0—1.0—蔗糖酶（ml）——1.01.01.0蒸馏水（ml）1.01.0——1.0摇匀，置37℃恒温水浴保温10min，然后每管加入Benedict试剂2ml，再放沸水浴5min。观察各管颜色变化，并解释实验结果。PARTONE【注意事项】唾液的稀释倍数因人而异，有时差别很大，稀释倍数可以是50～300倍。【思考题】若将淀粉酶和蔗糖酶煮沸1min，实验结果会发生什么样的变化？酶作用的专一性有哪几种？微量移液器的使用方法量程的调节按照从大体积调为小体积的方法调节。用拇指和食指旋转取液器上的旋钮，使数字窗口出现所需容量体积的数字。注意：千万不要将旋钮旋出最大量程，否则会卡住内部机械装置或者弹簧弹出而损坏了移液枪。枪头（吸液嘴）的装配

在将枪头（pipettetips）套上移液枪时，正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。