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不同烟草品种的抗旱性比较
1、 实验目的
烟草起源于雨量充沛的热带,对水分的要求很高,但在特定生长时期, 田间持水量如果未能保持在50%以上,就会严重影响烤烟的产量和品质。在烤烟生产中, 选育自身抗旱能力强的品种就显得尤为重要。抗旱鉴定就是对作物品种进行抗旱性筛选、评价的过程。本实验通过人工控水的方法模拟干旱条件,对5个烟草品种进行统一的干旱处理,并对多项与抗旱性有关的生理生化指标以及形态指标进行了测定,通过对各项指标进行综合分析,对不同烤烟品种的抗旱性进行了评价。
材料与方法
2.1 供试材料的选择与种植
本试验采用盆栽控水的方法造成干旱胁迫条件,称重法控制土壤含水量。供试烤烟品种为红大、K326、云烟87、云烟100、NC85。用漂浮育苗培育烟苗后,移栽于装有相同质量土和有机质的混合物的大盆中。
2.2 处理方法
移栽后正常浇水,待烟苗生长至对水分最敏感的旺长期,开始控制浇水造成干旱胁迫。前10d 处理水平为:土壤含水量占田间最大持水量的50%,造成中度胁迫;10d后的处理水平为:土壤含水量占田间最大持水量的30%,造成重度胁迫。重度胁迫5d后,开始进行有关指标的测定。整个过程模拟自然条件下干旱程度的逐步加剧过程。所有指标的测定均设3 次重复。
1.3测定的项目与方法
1.31 形态指标的测定
分别测量烟株的株高、叶长、叶宽、根系总吸收面积、根系体积、根干重、冠/根比。
指标
品种 红大 K326 云烟87 云烟100 株高 叶长 叶宽 冠/根比 根系体积 根干重
1.3.2 生理指标的测定
1.3.2.1离体叶片保水力的测定
取烟株展开顶叶,分别称其鲜重,并对每份样品进行编号,重复3~4次;将称过鲜重的叶片放入25℃~30℃的干燥器中,在黑暗条件下干燥2~6h,再称量失水后叶片的重量;
然后计算每份样品的失水率:
失水率(%)=%100×鲜重鲜重-失水后重
剪下叶片,擦干表面,迅速称量鲜重(FW),然后将其浸于蒸馏水中,4。C下暗处放置24h 吸水饱和,取出,吸水纸擦干表面水分,称量饱和鲜重( TW), 然后放于烘箱80。C烘48h,称量干重( DW),利用公式RWC =( FW- DW)/( TW- DW)*100% 计算相对含水量。
1.3.3生化指标的测定
1.3.3.1脯氨酸含量脯氨酸含量(μg/g)=(C×V/A)/W 或 脯氨酸含量(%)=(C×V/A)/W×10-4
式中:C—由标准溶液查得脯氨酸μg数;
V—提取液总体积(ml);
A—测定液总体积(ml);
W-样品重(g);1g=106μg。
1.3.3.2抗氧化酶( SOD、POD) 的提取和测定
取0.5g 叶片于预冷的研钵中,加1mL磷酸缓冲液在冰浴下研磨成浆,加缓冲液使最终体积为5mL。取2mL于12000r/ min下离10min, 上清液即为SOD,POD粗提液。显色反应后按公式计算其活性。
SOD总活性=?[(?Ack-AE?)×V]/(1/2Ack×W×Vt)
SOD总活性以鲜重酶单位每克表示(u/g?FW);比活力单位以酶单位每毫克蛋白表示;Ack为照光对照管的吸光度;AE为样品管的吸光度;V为样品液总体积(ml,1.6ml,加入PBS的体积);Vt为测定时的酶液用量(ml,30ul);W为样品鲜重(g,测定时应换算为叶绿体的质量mg);蛋白质含量单位为mg/g。
POD=(ΔA470×Vt)/(W×Vs×0.01×t)???(u/g?min)?
ΔA470:为反应时间内吸光度的变化;W为样品鲜重(g);t为反应时间(min);Vt为提取酶液总体积(ml,(1.6ml);Vs为测定时取用酶液体积(ml,30ul)。
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