比色法英与紫外可见光光度法.ppt

比色法与紫外可见光光度法 比色 光分析法 光谱法 吸收光谱法 原子吸收光谱法 紫外可见分光光度法（比色计） X射线吸收光谱法 红外吸收光谱法(红外碳硫) 核磁共振波谱法 发射关普法 原子发射光谱法（光谱） 原子荧光光谱法 化学发光法 磷光广度法 散射光谱法 拉曼散射光谱法 非光谱法 折射法 旋光法 比浊法 衍射法 偏振法 干涉法 基本原理 溶液颜色与光吸收的关系 波长 透射颜色 互补色 400~435 青紫 淡黄~绿 435~480 蓝 黄 480~490 淡绿~蓝 橙 490~500 淡蓝~绿 红 500~560 绿 紫 560~580 淡黄~绿 青紫 580~595 黄 蓝 595~610 橙 淡绿~蓝 610~750 红 淡蓝~绿 吸收定律 朗伯-比尔定律 I 1 A=lg----=lg----=kbc I0 T 式中k为比例常数 I0入射光强度 b为液层厚度 c为溶液浓度 T为透光率 I为透过光强度 A为溶液吸光度 吸光系数和摩尔吸光系数 摩尔吸光系数：如果液层厚度单位为cm，溶液浓度的单位为mol/L时的吸光系数，单位L/mol。cm。 ε越大，该物质的颜色越深，灵敏度越高。 目视比色法 定义：用眼睛观察，比较溶液颜色深浅来确定物质含量的分析方法。 原理：将标准溶液与被测溶液在同样的条件下，当溶液层的厚度相同，颜色深度一样时，两者浓度相等。 常用方法：标准系列法。 观测方法：从比色管口垂直向下观测。 分光光度法 原理：用滤光片、棱镜或光栅（光谱）来分光，得到单色光，让单色光照射有色溶液，没被吸收的透射光投射到光电池或关电倍增管上，产生光电流，其光电流大小与透射光强度成正比，从而求出被测物的含量。 光度计分类： 1、单光束分光光度计 分光度法 2、双光束分光度计。 分光光度法 入射波长 入射狭缝 参比溶液 吸光度及读数范围0.2-0.7 显色剂 显色反应：酸度、浓度、温度、时间、溶剂、干扰等。 溶剂 分光光度法应用 定性分析： 物质纯度鉴定 未知物鉴定：图谱 分子结构中官能团的推测：吸收峰 同分异构体的判别 定量分析： 单组分分析：工作曲线 多组分分析：测定吸收系数法，方程组。 差示分光光度法：用已知浓度的标准溶液作参比调节100%（A=0），然后将被测物质推入光路中。 分光光度法应用 无机元素分光光度法 有机物质紫外分光光度法 国家标准中有机物的分光光度法 食品分析 * *