紫外-可见光分光光度法.ppt

3.加入标准法所谓的加入标准法，即在一定浓度的试样溶液测定吸光度A0后，加入合适浓度的标准溶液，再测吸光度A1，或再加几次标准溶液，得A2,A3…吸光度，计算或作图外推求试样浓度的方法。即：A0=kC样；A1=k(C样＋C标）设试样体积为V0;加入的标准溶液体积为V标，则：A1=k(C样V0+C标V标)/(V0+V标），联解方程可求出C样。或用A对C标作图，外推求出C样。第30页，共77页，星期日，2025年，2月5日4.二元混合组分的测定混合溶液里两组分的测定有如图12－5的三种情况：（a）若1和2两组分的最大吸收峰互不重合，而且在1组分的最大吸收波长λ1处，2组分没有吸收；或在2组分的最大吸收波长λ2处，1组分无吸收。这样比较简单，按单组分测定方法测1和2两组分即可。（b）若1和2组分在混合溶液中的吸光光谱曲线如图12－5(b)所示，则当1和二混合在一起时，在1组分的最大吸收波长处，2组分无吸收，所以只需在λ1处测定1组分。但在λ2处所测定吸光度是1和2的总吸收，因此必须事先测得1组分在λ2的ε，先从λ1出1组分，再从叠加处得的和量中减去组分1。第31页，共77页，星期日，2025年，2月5日(c)这种情况比较复杂，要解一个一元二次方程。第32页，共77页，星期日，2025年，2月5日第33页，共77页，星期日，2025年，2月5日5.三元络合物的应用所谓的三元络合物是指由三个组分所形成的络合物。目的是提高灵敏度和选择性。例：[Co(H2O)3(NH3)3]2+淡红色[Co(H2O)2(NH3)4]2+暗红色[Co(H2O)(NH3)5]2+红色[Co(NH3)6]2+黄色第34页，共77页，星期日，2025年，2月5日4.4.2分光光度计第35页，共77页，星期日，2025年，2月5日停留分光光度计第36页，共77页，星期日，2025年，2月5日A原理第37页，共77页，星期日，2025年，2月5日第38页，共77页，星期日，2025年，2月5日光栅和棱镜分光原理光栅分光动画棱镜分光动画第39页，共77页，星期日，2025年，2月5日仪器光通路图第40页，共77页，星期日，2025年，2月5日B.分光光度计的类型动画第41页，共77页，星期日，2025年，2月5日双光束光度计动画示意动画第42页，共77页，星期日，2025年，2月5日双波长光度计光路示意图动画第43页，共77页，星期日，2025年，2月5日C.光电转换器I.定义光电转换器是将光辐射转化为可以测量的电信号的器件。S=kP+kd=kPk:校正灵敏度；P：辐射功率；kd:暗电流（可通过线路补偿，使为0）II.理想的光电转换器要求灵敏度高；S/N大；暗电流小；响应快且在宽的波段内响应恒定。第44页，共77页，星期日，2025年，2月5日第45页，共77页，星期日，2025年，2月5日1.硒光电池+-SeFe(Cu)h?玻璃Ag(Au)透明膜-收集极塑料--(当外电阻400?，i=10-100?A)优点：光电流直接正比于辐射能；使用方便、便于携带（耐用、成本低）；缺点：电阻小，电流不易放大；响应较慢。只在高强度辐射区较灵敏；长时间使用后，有“疲劳”(fatigue)现象。第46页，共77页，星期日，2025年，2月5日2.真空光电管90VDC直流放大阴极R-+光束e阳极丝（Ni）抽真空阴极表面可涂渍不同光敏物质：高灵敏(K,Cs,Sb其中二者)、红光敏(Na/K/Cs/Sb,Ag/O/Cs)、紫外光敏、平坦响应(Ga/As，响应受波长影响小)。产生的光电流约为硒光电池的1/10。优点：阻抗大，电流易放大；响应快；应用广。缺点：有微小暗电流（Darkcurrent，40K的放射线激发）。第47页，共77页，星期日，2025年，2月5日3.光电倍增管（photomultipliertube,PMT）石英套光束1个光子产生106~107个电子栅极，Grill阳极屏蔽光电倍增管示意图共有9个打拿极(dynatron)，所加直流电压共为90?1