茶籽饼茶皂素提取及抑菌效果的研究.PDF

2014年 1月 黑龙江生态工程职业学院学报 Jan．2014 第27卷第 1期 JournalofHeilongjiangVocationalInstituteofEcologicalEngineering Vo1．27No．1 doi：10．3969／j．issn．1674—6341．2014．01．014 茶籽饼茶皂素提取及抑菌效果的研究 马 戎 (福建师范大学 闽南科技学院，福建 泉州362332) 摘 要：采用有机溶剂法提取茶籽饼 中的茶皂素，使用无水乙醇对粗茶皂素进行纯化。经香草醛一硫酸显色， 使用紫外一可见分光光度计进行扫描得出最大吸收波长为54Onot。绘制茶皂素定量的标准曲线，测定成品茶皂素 的含量为41．9％。以提取的粗制茶皂素为原料，对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌进行了抑茵实验，结 果表明均有抑常】作用。 关键词：茶皂素；提取 ；纯化；抑茵 中图分类号：TQ423 文献标志码 ：A 文章编号：1674—6341(2014)01—0025—03 油茶是中国南方丘陵地区普遍种植的一种重要油料作 液用保鲜膜封 口冷却过夜 ，待结晶完全析出，抽滤 ，滤饼放进 物。我国是全世界油茶籽产量最高、品种最多、分布最广的 真空干燥箱中干燥，称重。 国家。目前，我国油茶籽年产量 120万吨左右，榨油后剩余 1．2．2 茶皂素定量分析——香草醛一浓硫酸显色法 的茶籽粕60万吨左右…。茶籽饼是油茶籽 、山茶籽制油后 1．2．2．1 显色反应 的副产物。茶籽饼不能直接作为饲料或者肥料使用，大量饼 将 自制的茶皂素标准品悬浮于无水醋酸中，滴加浓硫酸 粕被废弃，造成资源浪费。从茶籽饼中可以提取茶皂素。茶 2—3滴，观察颜色的变化 J。 皂素是一种性能优 良的非离子型天然表面活性剂 ，具有抗菌 1．2．2．2 8％(w／V)香草醛溶液的配制 性 、抗氧化性等多种生物活性，可广泛应用到各种行业中 。 称取香草醛 0．80g，倒入 10mL容量瓶中，无水 乙醇定 1 材料和方法 容，摇匀后备用。 1．1 材料和仪器 1．2．2．3 77％(V／V)硫酸溶液的配制 试验原料：茶枯饼 (产地福建三明)，大肠杆菌、芽孢杆 将95％(w／w)的硫酸77mL加入到23mL去离子水中， 菌 、金黄色葡萄球菌(福建师范大学闽南科技学院生化系提 放置于冰水中冷却后备用。 供)； 1．2．2．4 标准溶液的配制 试验试剂：石油醚，乙醇，无水醋酸 ，浓硫酸，蛋白胨，琼 精密称取茶皂素标准品0．0500g，用50％乙醇溶解 ，置于 脂 ，氯化钠，氢氧化钠，盐酸，香草醛均为分析纯； 50mL容量瓶中定容 ，摇匀备用。 试验仪器：索氏脂肪提取器 ，RE一2000A旋转蒸发仪 ， 1．2．2．5 茶皂素显色反应后最大吸收波长的确定 DZF一6021真空干燥箱，wFZuV一2000型紫外一可见分光 量取茶皂素标准溶液0．5mL放置于试管中，加入8％香 光度计，YP601N电子天平，高压灭菌锅，恒温培养箱。 草醛溶液0．5mL，放置于冰水中，加入 77％硫酸溶液4mL，摇 1．2 试验方 法 匀，60~C水浴中加热20min，冰水浴冷却 10min，取出放至室 1．2．1 茶皂素提取，纯化