核酸的酶促降解及核苷酸代谢.ppt

核酸的酶促降解和核苷酸代谢本章重点讨论核酸酶的类别和特点，对核苷酸的生物合成和分解代谢作一般介绍。第一节核酸的酶促降解返回第三节核苷酸的合成代谢第二节核苷酸的分解代谢

核酸的酶促降解一、核酸酶二、限制性内切酶核酸酶核苷酸酶核苷酸磷酸化酶核酸核苷酸核苷碱基+戊糖磷酸

核酸酶

1、核酸酶的分类（1）根据对底物的专一性分为（2）根据切割位点分为核糖核酸酶(RNase)脱氧核糖核酸酶(DNase)非特异性核酸酶核酸内切酶核酸外切酶2、核酸酶的作用特点

外切核酸酶对核酸的水解位点01B5′02Bp03B牛脾磷酸二酯酶（5′端外切5得3）04Bp05Bp06Bp07Bp08BpOHpp3′蛇毒磷酸二酯酶（3′端外切3得5）

内切核酸酶对RNA的水解位点示意图5′ppppOHPyPuPyPy1′pppGACUpppGA3′RNAaseIRNAaseIRNAaseT1RNAaseT1Pu：嘌呤Py：嘧啶

限制性内切酶?类型?命名?意义原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列，并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平末端，这类酶称为限制性内切酶（ristrictionendonuclease）。

常用的DNA限制性内切酶的专一性酶辨认的序列和切口说明‥‥AGCT‥‥‥‥TCGA‥‥‥‥GGATCC‥‥‥‥CCTAGG‥‥‥‥AGATCT‥‥‥‥TCTAGA‥‥‥‥GAATTC‥‥‥‥CTTAAG‥‥‥‥AAGCTT‥‥‥‥TTCGAA‥‥‥‥GTCGAC‥‥‥‥CAGCTG‥‥‥‥CCCGGG‥‥‥‥GGGCCC‥‥BamHIAluIBglIEcoRIHindⅢSalISmaI四核苷酸，平端切口六核苷酸，平端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口

限制性内切酶类型I型：分子量大于105，多亚基，需S-线苷蛋氨酸、ATP和Mg2+，识别位点与切割位点相差甚远，产物为异质，是限制与修饰相排斥的多功能酶.单击此处添加小标题1I型：识别位点为5-7bp的非对称序列，切割位点在顺序之外离识别序列5-10bp，切割双链，个别也切割单链。是限制与修饰相多功能酶.单击此处添加小标题3单击此处添加小标题型：分子量小于105，需Mg2+，切割位点位于识别位点上，产物为专一性片段，不具修饰酶功能。现在分子生物学研究所用的限制性内切酶均为此类。2

限制性内切酶的命名和意义EcoRI序号属名种名株名例：EcoRI，这是从大肠杆菌（Ecoli）R菌珠中分离出的一种限制性内切酶限制性内切酶是分析染色体结构、制作DNA限制图谱、进行DNA序列测定和基因分离、基因体外重组等研究中不可缺少的工具，是一把天赐的神刀，用来解剖纤细的DNA分子。

核苷酸的降解2、嘧啶的降解1、嘌呤的降解核苷酸酶核苷酸磷酸化酶核苷酸核苷碱基+（脱氧）戊糖磷酸

嘌呤的分解PART1

嘧啶的分解

核苷酸的合成代谢单击此处添加小标题核糖核苷酸的生物合成单击此处添加小标题脱氧核糖核苷酸的生物合成单击此处添加小标题单核苷酸转变成核苷二磷酸和核苷三磷酸单击此处添加小标题各种核苷酸的相互转变

核糖核苷酸的生物合成嘌呤核苷酸的生物合成01从头合成途径02补救途径03嘧啶核苷酸的生物合成04从头合成途径05补救合成途径06

嘌呤核苷酸的从头合成途径c、IMP转变为AMP和GMP添加标题嘌呤环上原子的来源添加标题b、IMP的从头合成添加标题

嘌呤环上各原子的来源N3N9N7N1C2C6C4C5C8来自谷氨酰胺的酰胺氮来自甲酸来自甲酸来自天冬氨酸来自甘氨酸来自CO2

IMP的生物合成一碳基团代谢

IMP转变为GMP和AMP

嘌呤核苷酸合成补救途径添加标题磷酸核糖转移酶添加标题A(G)MP+PPi添加标题嘌呤+PRPP添加标题嘌呤+1-P-核糖添加标题嘌呤核苷添加标题A(G)MP添加标题ATP