缺血性脑血管病患者CYP2C19基因多态性分析的开题报告.docx

缺血性脑血管病患者CYP2C19基因多态性分析的开题报告 一、研究背景 缺血性脑血管病是导致脑缺血性病变的重要疾病类型之一，其发生率和病死率在全球范围内均居高位。目前，缺血性脑血管病的治疗主要依赖于药物干预，其中，阿司匹林是常用的抗血小板药物，可用于预防缺血性脑卒中的发生。而CYP2C19基因的多态性与阿司匹林代谢相关，因此，对CYP2C19基因多态性进行分析，有可能为缺血性脑血管病的个体化治疗提供依据。 二、研究目的 本研究旨在探究CYP2C19基因多态性在缺血性脑血管病患者中的分布情况，以及其与阿司匹林代谢和治疗效果之间的关系，为缺血性脑血管病的个体化治疗提供依据。 三、研究方法 3.1.样本来源 本研究选取20例确诊为缺血性脑血管病的患者为研究对象，采集其外周血样本，以提取DNA作为PCR反应的模板。 3.2. PCR扩增 选取CYP2C19基因中与药物代谢相关的rs4244285、rs4986893和r个位点进行分析，设计引物，进行PCR扩增。PCR反应体系为25μl，其中包括模板DNA0.5μl、引物0.3μl、2.5μl buffer、2.5μl MgCl2、0.2μl Taq酶和21μl nuclease-free water。PCR反应条件为：95℃预变性5min，94℃变性30s，54℃退火30s，72℃延伸30s，循环35个周期，最后延伸72℃5min。 3.3.酶切与测序 采用限制性内切酶对PCR产物进行酶切，用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测酶切产物，判断患者在CYP2C19基因的位点rs4244285、rs4986893和r的基因型。同时，利用基因测序技术对部分样本进行验证。 四、研究意义 本研究通过分析缺血性脑血管病患者中的CYP2C19基因多态性分布情况，为个体化治疗提供依据，也有助于减少药物不良反应的发生，提高药物的利用效率，为该疾病的治疗提供参考。